При тяжелых травмах и ранениях на охоте или в боях между собаками, болезнях возникает необходимость в переливании крови для спасения животного. Для этих целей подбираются доноры и создаются специальные банки при ветеринарных клиниках. Есть ли у собак группа крови? Ведь если есть, то возникает необходимость в определении совместимости крови разных животных с помощью классификации ее видов, то есть выделения в группы. Информация о группе еще нужна при разведении породы, для установки отцовства. Об этом и поговорим далее.

Как у всех млекопитающих, в организме собаки есть сердечно-сосудистая система, заполненная кровью. Она содержит в себе два основных компонента: плазму, то есть жидкую составляющую, и различные клетки. Они находятся в соотношении 70% и 30%. В плазме растворены белки, гормоны, витамины, питательные вещества.

К клеткам относятся эритроциты, тромбоциты, лейкоциты. Кровяные тельца красного цвета – эритроциты, представляют наибольшую группу. В эритроцитах содержится железосодержащий красный пигмент – гемоглобин, поставщик кислорода к тканям. Именно гемоглобин окрашивает ее в красный цвет. Тромбоциты, во взаимодействии с белками, способствуют ее свертываемость при повреждениях тканей и сосудов, предупреждая потери. Клетки белого цвета – лейкоциты, стоят на страже иммунной системы.

Функции

Кровь является основой жизни организма. Она обеспечивает циркуляцию кислорода, ферментов, электролитов, питательных веществ между тканями. В ее функцию также входит удаление избытка воды, минеральных веществ, продуктов обмена через легкие, почки, кишечник.

Терморегуляторная и защитная функции крови собаки разносят тепло и защищают от инфекций и кровопотерь. Она является основным гомеостатиком, поддерживая кислотное равновесие и водно-электролитный баланс.

Сколько групп крови у собак

Группы у них отличаются от человеческих. Выделяют 11 основных групп, которые отличаются составом белков на поверхности эритроцитов и типу антигена. В системе обозначения используются цифры 1-11 и буквы латиницы A,Tr, B, C, D, F, J, K, L, M, N. Кровь у большей половины собак, независимо от породы, определяется как 1-я или А группа.

Группа крови у собак и кошек серьезно отличается. У кошек различают всего лишь 3 группы и они несовместимы.

В зависимости от типа известных эритроцитных антигенов у собак принято междуврачебное обозначение DEA – Dog Erythrocyte Antigen. И различают 6 групп DEA1.1, DEA1.2, DEA3, DEA4, DEA 5, DEA 7. Группы DEA1.1— и DEA4+ считаются универсальными для донорства. Однако не стоит забывать об индивидуальных особенностях организма. Тест на совместимость нужно провести обязательно.

Какая группа крови у собак наиболее универсальна

Важным является фактор DEA1.1, который заносится в паспорт собаки. Он может быть положительным и отрицательным. Половина животных имеют DEA1.1+. Им можно транспортировать кровь любой собаки, желательно с таким же фактором DEA1.1+. А вот те, у кого DEA1.1— считаются универсальными донорами.

Если при переливании (гемотрансфузии), использовать донора с DEA1.1+, а реципиента с DEA1.1—, то первый раз пройдет успешно, так как отсутствуют антитела к другой крови. А к следующему разу у реципиента уже появятся антитела. При повторном переливании возможны иммунные реакции с тяжелыми последствиями.

Совместимость крови проверяют смешиванием двух видов и наблюдают наличие антигенов. Либо применяют специальные тесты совместимости. В любом случае проверка на совместимость обязательна.

Резус фактор у собак, по примеру людей, отсутствует.

Примечательно, что собачья кровь не имеет различий, связанных с породой. От можно переливать, например, а от можно при условии их совместимости.

Если появилась такая необходимость, то определить группу крови собаке круглосуточно получится в дежурной ветеринарной клинике. Там обязательно найдется необходимый инвентарь и квалифицированный персонал, который вам поможет. После установления всех необходимых параметров, их обязательно нужно записать в паспорт вашего питомца.

ГРУППЫ КРОВИ У СОБАК

В последнее время вопрос о переливании крови собакам приобрел большое практическое значение. Разведение высокоценных животных и их использование в охоте на крупного зверя или как бойцовых собак стимулировало детальное изучение групповых факторов у собак с целью подбора доноров для собак, потерявших большие количества крови.

На данный период времени у собак описаны 11 систем групп крови, которые обозначают или цифрами от 1 до 11, или латинскими буквами (А, Тг, В, С, D, FJ, К, L, M, N).

Наиболее распространена среди собак 1-я группа крови (или группа А). По оценке специалистов около 60% собак имеют именно эту группу крови. При однократном (первом у реципиента) переливании крови группа А пригодна в качестве донорской крови, практически, для всех собак. Однако, у А-отрицательных реципиентов в ответ на переливание А-положительной донорской крови развивается реакция сенсибилизации. Потому, повторное переливание крови по этой схеме недопустимо из-за развивающейся в этом случае у реципиента гиперчувствительности 2-го типа, которая может привести к гибели собаки.

Поскольку подбор донора для реципиента с А-негативным статусом проблематичен, то можно считать, что успешное повторное переливание крови на практике невозможно.

КРОВООБРАЩЕНИЕ

Кровь выполняет все свои многообразные функции только при условии ее постоянного движения по кровеносным сосудам.

Основной причиной движения крови по кровеносной системе является разница давления крови в начале кругов кровообращения и в конце кругов кровообращения. По законам физики, кровь, как и любая другая жидкость, течет из области высокого давления в область более низкого давления. В пределах большого круга кровообращения это выглядит следующим образом (рис. 34): в аорте на выходе крови из левого желудочка давление крови максимально и составляет 180 мм рт. ст., в капиллярах, через стенки которых происходит обмен веществ между кровью и остальными тканями организма, давление равно 10 - 20 мм рт. ст., а в конце круга кровообращения - в полых венах - давление минимально и равно нулю.

Разницу давления создают несколько факторов. Прежде всего это сердце. Сердце влияет на величину кровяного давления двояко. Во-первых, оно работает как нагнетательный насос при сокра-

Рис. 34. Изменение величины давления крови при ее движении

по большому кругу при физической нагрузке собаки

1- аорта; 2 - средние артерии; 3 - мелкие артерии; 4 - артериолы; 5 - капилляры; 6 - венулы; 7 - средние вены; 8 -полые вены

щении (систоле) желудочков с силой выбрасывая кровь в кровеносное русло (в нашем примере в аорту) и повышая давление крови на стенки сосудов. Однако, это влияние сердца угасает в капиллярной сети.

Во-вторых, сердце при расслаблении (диастоле) работает как присасывающий кровь насос. Расслабляясь, сердечная мышца создает в сердечных полостях некоторое разряжение, что приводит к падению давления крови на стенки полых вен до нуля и обеспечивает заполнение кровью предсердий, а затем желудочков.

Кроме сердца на движение крови в венах влияют сокращения скелетных мышц, т. к. вены, как правило, располагаются в непосредственной близости от них. При движении мышцы сокращаются и оказывают давление на вены, из которых кровь в этом участке выдавливается. А так как вены имеют кармашковые (полулунные) клапаны, регулирующие направление кровотока, то кровь при мышечных сокращениях из вен выдавливается только в сторону сердца.

Венозному кровотоку в полых венах, помогают и дыхательные движения грудной клетки, так как в фазе вдоха в плевральной полости развивается пониженное давление, способствующее насасыванию крови в полые вены.

Таким образом, сердце представляется главным органом, обеспечивающим движение крови по сосудам. Поэтому контроль за сердечной деятельностью является важным элементом контроля за физиологическим состоянием собаки в целом.

В норме сердце работает ритмично в три фазы: систола (сокращение), диастола (расслабление) и пауза. Частота, с которой сердце сокращается у собак, сильно зависит от породной принадлежности, а точнее от величины животного. Так у крупных пород (доги, мастино, сенбернар, кавказская овчарка, ризеншнауцер и пр.) частота сердечных сокращений составляет в покое 60 - 80 ударов в минуту. Для средних собак (миттельшнауцер, фокстерьер, керриблютерьер и пр.) за норму можно принять частоту в 70-100 ударов в минуту. А у мелких собак (болонки, карликовый пинчер, цвиргшнауцер и пр.) сердце даже в покое сокращается с частотой 100-140 ударов в минуту. Поэтому, категоричных указаний на этот счет делать не следует. Для каждой собаки надо определить ее физиологическую норму. Для этого нужно пальпировать область грудной клетки в пределах 4 - 6 ребра и грудной кости с левой стороны в момент отдыха животного в нормальных для него температурных условиях. В этом месте сердечный толчок ощущается практически у всех собак независимо от их размеров, оброслости или физиологического состояния. При затрудненной пальпации можно прослушать сердце при помощи фонендоскопа.

Естественно, что при физических нагрузках частота сокращений сердца возрастает и может состалять 200% от того значения, которое регистрируется в состоянии покоя. Существенно возрастает частота сердечных сокращений летом в сильную жару у собак с развитым шерстным покровом (немецкая овчарка, нестриженные шнауцеры, ньюфаундленды и др.). Поэтому, большие физические нагрузки в это время не всегда полезны животным. Прежде всего это относится к старым и ожиревшим животным. В очень сильную жару, для того,

Волокна Пуркинье (поперечные мышцы сердца)

Рис. 35. Проводящая система сердца

чтобы снять дополнительную нагрузку с сердца, целесообразно провести внеочередную стрижку или триминг собаки, даже если это не входит в клубный план подготовки собаки к выставкам. Все-таки, забота о здоровье вашего друга должна стоять выше плана клубной работы.

Сердце работает ритмично благодаря наличию в нем, так сказать, "генератора" ритма, - или проводящей системы сердца. Проводящая система сердца это собственно часть нервной системы, представленная скоплением специфических клеток, главной задачей которой является генерация спонтанной электрической активности и обеспечение очередности возбуждения предсердий и желудочков. Схематически расположение элементов проводящей системы представлено на рис. 35.

Импульс, дающий начало сердечному циклу, зарождается в узле Кис-Фляка, расположенном в правом предсердии. При этом, происходит возбуждение предсердий и их сокращение. Далее возбуждением охватывается узел Ашов-Тавара на границе предсердий и желудочков, пучок Гиса и волокна Пуркинье. Это сопровождается сокращением желудочков. После некоторой паузы, составляющей доли секунды, возбуждение вновь зарождается в узле Кис-Фляка и сердечный цикл повторяется.

Рис. 36. Электрокардиограмма собаки (схема)

Таким образом, сердце работает, как бы, в автономном режиме. Регулирующие системы организма (нервная и гуморальная) могут лишь изменить частоту возбуждения водителя ритма сердца.

Возбуждение проводящей системы сердца и сокращения сердечной мышцы сопровождаются образованием электрического потенциала, который доходит до поверхностных тканей. Этот потенциал можно зарегистрировать при помощи чувствительных приборов с поверхности тела. Процесс этот известен как электрокардиография. Анализ электрокардиограммы дает специалистам богатую информацию о состоянии сердечно-сосудистой системы (рис. 36, 37).

Принимается во внимание высота, протяженность во времени, форма и периодичность появления каждого зубца (рис. 36). Все это позволяет судить не только о состоянии возбудимости отдельных элементов проводящей системы и сердечной мышцы, но и о работе, выполняемой сердцем.

Техника электрокардиографии универсальна. Биотоки сердца снимаются, как минимум, при помощи трех стандартных отведений по схеме, представленной на рисунке 37.

В последнее время для обследования сердца стали широко применять ультразвуковой метод. Этот метод оценивает линейные размеры сердца, сократимость сердечной мышцы, наличие участков с низкой сократимостью (рубцы), а также производительность сердца как нагнетального насоса (фракция выброса).

Рис. 37. Вид нормальной электрокардиограммы на основных отведениях и схема наложения электродов на теле собаки

В современной ветеринарной медицине активно используется переливание крови - гемотрансфузия, порой так необходимая для спасения жизни животного. Однако, точно так же, как и с кровью человеческой, здесь можно столкнуться с несовместимостью. Упускать такой момент не стоит, ибо использование неподходящих групп крови при переливании может привести к крайне тяжёлым последствиям вплоть до гибели собаки.

Кровь и её функции

Морфологическое строение организма собак несильно отличается от человеческого. Соответственно, сосуды, заполненные кровью, у них тоже имеются. Кровь - это жидкость, состоящая из двух компонентов – плазмы (70%) и клеток крови (30%). К клеткам относятся эритроциты, лейкоциты (иммунитет) и тромбоциты (свёртываемость крови).

Кровь выполняет следующие функции:

• транспортная
• дыхательная
• терморегуляторная
• защитная
• гомеостатическая (поддерживает постоянство внутренней среды организма)

Перенос питательных веществ и кислорода по организму происходит благодаря эритроцитам. Они же и определяют различия групп крови у собак.

Эритроциты и группы крови

На поверхности эритроцитов находятся специальные белки, называемые антигенами. В плазме же крови находятся антитела к эритроцитарным антигенам, они распознают «свои» белки и «чужие». Именно на такой системе построена классификация групп крови.

Сегодня в ветеринарной медицине нет «почётных доноров», в хранилищах клиник не так много крови, готовой к переливанию. Такие предпосылки создают определённые трудности в поисках донора.

Системы групп крови у собак

В 1971 году в США была создана общепринятая номенклатура определения групп крови у собак – Dog erythrocyte antigen (DEA). На основании этой номенклатуры выделяют следующие системы:

• DEA 1.1
• DEA 1.2
• DEA 3
• DEA 4
• DEA 5
• DEA 6
• DEA 7
• DEA 8

DEA 1 система

В этой системе выделяют 4 возможных варианта групп крови. Разделение зависит от трёх антигенов.

Как же нужно производить переливание крови в рамках системы DEA 1:

• При переливании крови DEA 1+ (1, 2, 3) к DEA 1- (0) в первый раз эритроциты новой крови продержатся около 8 суток, прежде чем будут выработаны антитела, которые разрушат чужеродные клетки. Во второй раз, когда антитела в крови уже имеются, донорские эритроциты не проживут и одного дня, что сводит результативность переливания к нулю
• Группы DEA 1.1, 1.2, и 1.3 имеют свои индивидуальные особенности в столкновении с антителами. Тяжелее всего реципиентом переносится переливание крови DEA 1.1
• Можно переливать кровь DEA 1- к положительным группам без осложнений. Но только при условии, что ранее она не была реципиентной.

DEA 3 система

Здесь выделяют 2 группы:

При переливании положительной по антигену крови к отрицательной, гибель эритроцитов происходит в течение 5 дней и сопровождается осложнениями.

DEA 4 система

В этой системе, как и в предыдущей, только 2 группы – положительная и отрицательная.

Особенности переливания:

• Кровь положительную можно переливать к отрицательной даже если у последней уже имеются антитела
• После нескольких переливаний подряд возможны осложнения

DEA 5 система

Переливание крови, положительной по антигену, к отрицательной вызывает сильную ответную реакцию, сопровождающуюся гибелью эритроцитов в течение 3х дней.

DEA 6 система

Имеется 2 группы: положительная и отрицательная. При переливании наблюдается умеренная реакция реципиента, без выраженных осложнений.

DEA 7 система

В этой системе выделяют 3 группы:

При первом переливании новые эритроциты долго находятся в организме реципиента. Повторная гемотрансфузия в кровь с уже выработанными антителами не даёт нужного эффекта, так как эритроциты гибнут через 3 дня.

DEA 8 система

Как и многие другие, эта система на данный момент изучена мало, поэтому сведения о переливании отсутствуют.

Для применения в лабораторных условиях

ВАЖНОЕ ПРИМЕЧАНИЕ О ФОРМАТЕ ТЕСТОВОЙ ПЛАТЫ
Просьба внимательно прочесть и соблюдать последовательность этапов.

Вещества, лиофилизованные в лунках с положительным контролем и с пробой пациента, неодинаковы.
Результаты анализа получены только с использованием пробы крови пациента, как в лунке с положительным контролем, так и в лунке с пробой пациента.

Описание и назначение:

Хотя общеизвестен факт, что у собак нет изоантител к несовместимым группам крови, и поэтому они в целом хорошо переносят переливание крови при несовместимости групп, но рациональная ветеринарная практика призывает избегать переливания несовместимых групп крови, за исключением неотложных состояний. Период полувыведения переливаемых несовместимых клеток будет довольно непродолжителен, и поэтому возможно, что должный терапевтический результат не будет достигнут. Также необходимо учитывать потенциальные потребности пациента в будущем. Антитела, получаемые от переливания несовместимой крови, могут образоваться только спустя 5-7 дней, и будут обладать долговременной жизнеспособностью. Это исключает возможность использовать в последствии несовместимую кровь при критическом положении.
К тому же, специалисты по разведению животных должны обратить особое внимание на антитела, вырабатываемые у самок при сенсибилизации в результате переливания крови несовместимых групп. Так как антитела присутствуют в молозиве, то самки с антителами к определенной группе крови не должны скрещиваться с самцами с этой группой крови, если предполагается, что они будут выкармливать будущих щенят. У грудных щенят разовьется гемолиз, обусловленный наличием изоантител, и они могут быть восприимчивы к заболеванию или даже умереть в результате гемолитической анемии. На поверхности эритроцитов собак идентифицированы восемь специфических антигенов. На этих антигенах основывается принятая во всем мире система групповых антигенов крови у собак, «DEA» (Dog Erythrocyte Antigen = Эритроцитарный Антиген Собак). В ней характеризуются восемь общих групп крови, антигены DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8.
DEA 1.1, 1.2 – наиболее значимые антигены в крови собаки. Оба они высокоаллергенны, но DEA 1.1 – основной литический фактор в гемотрансфузиологии собак. Хотя все группоспецифические антигены системы АВ0 могут стимулировать образование изоантител, DEA 1.1 обладает сильнейшим стимулирующим потенциалом. Поэтому большинство реакций в результате переливания несовместимых клеток происходит, когда DEA 1.1-положительная кровь дается DEA 1.1- отрицательному реципиенту. Клинические значимые реакции при DEA 1.2 могут возникнуть, но слабее, чем при DEA 1.1. DEA7 может быть фактором при трансфузионных реакциях, но так как это холодовый агглютинин и изоантитело природного происхождения, считается, что у него очень низкая клиническая значимость. Считается, что оставшиеся антигены вызывают клинически незначительные проблемы при переливании.
В идеале предполагается, что вся переливаемая кровь DEA 1.1 и 1.2-отрицательная. Некоторые породы, например, борзые, особенно подходят в качестве доноров в связи с тем, что антигены DEA 1.1, DEA 1.2 и DEA 7 встречаются редко. Тем не менее, пока повсеместно не принята концепция банка собачьей крови, при которой кровь можно было бы приобрести незамедлительно, нормой остается переливание от собак, которые представлены в регионе в нужное время.
По оценкам 40% всех собак - DEA 1.1-положительные. Поскольку у некоторых собак происходит аутоагглютинация, и поскольку от очень анемичной собаки могут получиться сомнительные результаты, то прежде чем получать какую-либо информацию, показано типирование. Определение у собаки DEA 1.1-положительность либо отрицательность при рождении намного упрощает принятие решения в будущем. DEA 1.1-положительная собака может получать как DEA 1.1-положительную, так и отрицательную кровь. DEA1.1-отрицательная собака не должна получать DEA1.1-положительную кровь. RapidVet-H (Canine 1.1) предназначен для использования при классификации собак на DEA 1.1-положительных и отрицательных.

Условия проведения процедуры:

• Для получения точных результатов очень важно соблюдать последовательность операций.
• Всегда использовать новую пипетку для нового образца и новую мешалку для новой лунки. Повторное использование любого средства приведет к перекрестной контаминации и неточным результатам.
• Отдельные компоненты системы имеют разную стабильность. Хранить компоненты в соответствии с указаниями на маркировке. Не использовать компоненты после истечения указанного срока годности. Использование материалов с истекшим сроком годности может стать причиной недостоверных результатов.
• Разбавитель поставляется в бутылке с резьбовой крышкой для того, чтобы свести к минимуму непреднамеренное бактериальную либо иную контаминацию. Не использовать разбавитель из других источников в лаборатории.
• Механическая целостность пробы пациента крайне важна для правильности результатов.
• Всегда забирать полный шприц или пробирку с содержанием ЭДТА. Меньшее количество крови приведет к высокой концентрации ЭДТА в анализируемом образце.

Известные мешающие вещества: нет
Утилизация: Все биологические материалы, пипетки и мешалки утилизировать безопасным способом в соответствии со стандартами

Принцип и интерпретация анализа:

Анализ RapidVet-H (Canine DEA1.1) основан на реакции агглютинации, которая происходит, когда эритроцит, содержащий антиген DEA 1.1 на мембране поверхности взаимодействует с мышиным моноклональным антителом, специфичность которого к DEA 1.1 доказана, которое лиофилизуется на тестовой плате. Моноклональное антитело повторно растворяется разбавителем до формы антисыворотки, и тщательно перемешивается с цельной кровью пациента. Все DEA 1.1-положительные эритроциты реагируют с антисывороткой, вызывая агглютинацию. Антисыворотка совершенно не реагирует со всеми DEA 1.1-отрицательными эритроцитами. Результаты определяются визуально.

Внимание: У некоторых собак проявляется аутоагглютинация разной степени в связи с сывороточными факторами, которые вызывают у пациента агглютинацию собственных эритроцитов. Если это проявляется у пациента в опытных условиях, то этого пациента невозможно будет определенно типировать без выделения сыворотки и последовательной промывки оставшихся эритроцитов перед проведением анализа. В RapidVet-H (Canine DEA 1.1) имеется лунка для скрининга таких пациентов.

Реагенты и материалы:

Платы для агглютинационной пробы. На каждой плате имеется 3 визуально определяемых лунки, обозначенных как "Солевой скрининг на аутоагглютинацию", "DEA 1.1 положительный контроль" и "Проба пациента". Платы упакованы в индивидуальную упаковку с этикеткой, в каждой содержится пакет с осушителем. Хранить при комнатной температуре или в холодильнике (2-7°C). 1 бутылка с разбавителем. Прозрачная пластиковая бутылка содержит 0.02 моль/л фосфатного буфера (ФСБ) с pH 7.4. Капельный наконечник дозирует 50 мкл. Хранить при комнатной температуре или в холодильнике (2-7°C).
Пипетки и мешалки. В каждом полиэтиленовом пакете содержатся пластиковые пипетки и мешалки.

Хранение и стабильность:

• Платы для агглютинационной пробы стабильны при комнатной температуре (20-25°C) в течение 19 месяцев с даты изготовления. На каждой тестовой плате пропечатана дата истечения срока годности. Хранение в холодильнике (2-7°C) существенно не увеличивает период стабильности, но не оказывает отрицательного влияния на анализ и защищает от неожиданных или даже неустановленных изменений комнатной температуры вне данного диапазона. Нет необходимости выдерживать тестовую плату при комнатной температуре перед использованием.
• Разбавитель стабилен 24 месяца с даты изготовления. На каждой бутылке нанесена дата истечения срока годности.

ПРИМЕЧАНИЕ: На каждой тест-системе RapidVet-H (Canine 1.1) напечатана дата истечения срока годности, которая представляет собой ближайшую дату истечения срока годности среди компонентов системы. Не смотря на то, что у некоторых компонентов индивидуальные даты истечения срока годности могут быть позднее, их применение с другими компонентами из других систем не рекомендуется.

Последовательность операций:

• ЗАБРАТЬ у пациента минимум 0.4 мкл. крови в шприц или в пробирку, покрытую любо содержащую ЭДТА в качестве антикоагулянта. Для анализа требуется всего 100 мкл. цельной крови.
• ДОСТАТЬ тестовую плату из пластиковой упаковки.
• НАПИСАТЬ на плате кличку/номер собаки и дату проведения анализа.
• ПОМЕСТИТЬ тестовую плату на плоскую поверхность.
• ДОЗИРОВАТЬ 1 каплю разбавителя (50 мкл.) из капельного дозатора в лунку, обозначенную "Солевой скрининг на аутоагглютинацию".
• ВЗЯТЬ небольшое количество пробы пациента в пипетку и поместить 1 каплю (50 мкл.) в лунку, обозначенную "Солевой скрининг на аутоагглютинацию". Эта лунка не содержит реагентов. С помощью мешалки, УВЕРЕННО НАЖИМАЯ ВНИЗ распределить и перемешать материалы по ВСЕЙ лунке в течение примерно 10 секунд. (См. Примечание 1 по правильному использованию пипетки). У небольшого процента больных собак и здоровых собак происходит аутоагглютинация. Если наблюдается аутоагглютинация, ПРЕКРАТИТЬ анализ и перед тем, как продолжить, провести стандартную процедуру промывки клеток.
• ДОЗИРОВАТЬ 1 каплю разбавителя (50 мкл.) из капельного дозатора в каждую из 2 оставшихся лунок. Разбавитель помогает при реконструкции лиофилизованного материала в контрольной лунке и в лунке пациента.
• ВЗЯТЬ небольшое количество пробы пациента в пипетку и поместить 1 каплю (50 мкл.) в лунку, обозначенную "Положительная проба", и 1 каплю – в лунку, обозначенную "Проба пациента". С помощью новой мешалки, УВЕРЕННО НАЖИМАЯ ВНИЗ, распределить и перемешать материалы по ВСЕЙ лунке в течение примерно 10 секунд.
• ПОТРЯСТИ плату поперечным движением в течение 2 минут, обеспечивая перемешивание и "переворачивание" материалов внутри каждой лунки.
• УСТАНОВИТЬ плату под углом 20-30 ° на 2 минуты, чтобы избыток крови сбежал вниз лунки. Этому поспособствует размещение пакета с осушителем в верхней части платы.
• СЧИТАТЬ результаты и отметить лунки, в которых произошла явная агглютинация.

ПРИМЕЧАНИЕ 1: Использование пипетки: Удерживать пластиковую часть между большим и указательным пальцами у плоского заделанного конца, плотно нажать и не ослаблять давление. Удерживать часть для образца вертикально, поместить открытым концом пластиковой части ниже поверхности образца. Ослабить давление пальцев и забрать пробу. Далее удерживать пипетку в перпендикулярном положении прямо над лункой, в которую доставляется проба. Слегка нажать и выпустить одну каплю в лунку (50 мкл.). Дизайн пипетки таков, что выделяется немного более 50 мкл. для компенсации того небольшого количества образца, которое остается на мешалке.
Каждую пипетку использовать один раз, затем утилизировать. Ни при каких обстоятельствах не использовать пипетку повторно, так как может возникнуть перекрестная контаминация, приводящая к неточности результатов анализа.

Результаты:

Если анализ проведен правильно, в лунке, обозначенной "DEA1.1 Положительный контроль", должна произойти визуально определяемая, явная агглютинация.

ПРИМЕЧАНИЕ: Единственное назначение лунки "DEA 1.1 Положительный контроль" – контролировать правильность проведения анализа. Материал, лиофилизованный в лунке "DEA1.1 Положительный контроль" не тот же, что в лунке "Проба пациента".
Если проявляется явная агглютинация пробы пациента в лунке, обозначенной "Проба пациента", то пациент - DEA 1.1-положительный. Если визуально не обнаружено агглютинации в лунке, обозначенной "Проба пациента", то пациент - DEA 1.1-отрицательный. Любая мелкозернистость, гранулярность, появляющаяся спустя 2 минуты, не учитывается при определении результатов. Скорость агглютинации и размер сгустков клеток у DEA 1.1-положительных пациентов может быть разной. В отличие от людей, некоторые животные могут обладать более чем одной первичной группой крови. В таком случае эритроциты могут нести антигены по каждой такой группе. Такое животное будет нести меньше антигенов DEA 1.1, чем животное, у которого в качестве первичной группы крови только DEA 1.1.
Если пациент очень анемичен, то агглютинация образца может быть разъединенной, в форме небольших скоплений, каждое с головку большой булавки, а не в виде явной агглютинации.

Гемотрансфузия – это переливание больному животному либо цельной крови, либо ее компонентов или белковых препаратов плазмы. Это довольно серьезная процедура по транспортировке живой ткани животного.

В четырех случаях их пяти переливание крови собакам требуется из-за анемий и только каждой пятой собаке – для лечения геморрагического шока. Данное мероприятие – одно из самых значимых в современной ветеринарной реаниматологии, поскольку играет решающую роль в преодолении критического состояния организма и нередко помогает спасти жизнь животному.

В клинической ветеринарной практике переливание крови производится:

1. с целью замещения — полученные от донора эритроциты остаются в крови реципиента в течение 1-4 месяцев, что, естественно, способствует повышению содержания кислорода в тканях;
2. с целью стимуляции – воздействие на разные органы и системы организма собаки;
3. с целью улучшения гемодинамики – гемотрансфузия способствует улучшению работы сердечно-сосудистой системы, увеличению ОЦК, повышению минутного объема сердца и пр.;
4. с гемостатической целью – стимулируется гемостаз реципиента, наблюдается умеренная гиперкоагуляция, которая объясняется повышением тромбопластической и уменьшением антикоагулянтной функции крови.

Данная процедура показана собакам с выявленным острым кровотечением, на которое указывают бледные слизистые оболочки, холодные лапы, частый и слабый пульс. Важно понимать, что внутренние кровотечения, в отличие от внешних кровопотерь, довольно нелегко диагностировать, если животное испытывает шок. Питомцу, испытывающему геморрагический шок вследствие сосудистых, желудочно-кишечных и других кровотечений, необходимо незамедлительно провести эмпирическую гемотрансфузию и ввести необходимое количество кристаллоидов. Кроме того, показаниями к переливанию являются хронические кровопотери и нестабильная гемодинамика, указывающие на доставку кислорода в ткани в недостаточном количестве. Для диагностики подобных состояний используют такие показатели, как количество гемоглобина, гематокрит и количество эритроцитов.

Снижение эритропоэза возникает вследствие истощения истощение эритропоэтической реакции при низком гемоглобине, иммунные механизмы (апластическая анемия и парциальная красноклеточная аплазия), дефицит железа, витаминов, повреждения почек, а также под влиянием разнообразных факторов: ионизирующее излучение, химические вещества, в т.ч. лекарственные средства, инфекции (например, вирусные). Нередко причину установить не удается.

Переливание крови собакам показано при наследственной или приобретенной коагулопатии, тромбоцитопении, лейкопении, гипопротеинемии (при ограничениях для применения плазмы). Срочная гемотрансфузия проводится при быстром уменьшении циркулирующего объема (< 30%), гематокрите менее, чем 20% (менее 15% у кошек), непрерывном кровотечении или гемолизе, плохой реакции на традиционное лечение, бледных слизистых оболочках, повышенном времени заполнения капилляров (более 2 секунд), тахикардии, тахипноэ.

Группы крови у собак

Всего у собак выделяют 7 групп крови, каждая из которых определяется по антигенной принадлежности: А, В, С, D, Е, F и G. Принадлежность к той или иной группе крови, как правило, не имеет значения, когда требуется процедура переливания. Было установлено, что у собак естественно возникающие антитела – очень редкое явление, и даже если их обнаруживают в сыворотке, то только в низких титрах либо вступают в реакцию в условиях температурного режима, отличающегося от температуры тела животного. Таким образом, не более, чем у 15 процентов собак наблюдаются естественно возникающие антитела к группам крови и их появление не нужно путать с приобретенными антителами. Отличие первых состоит в том, что их появление никоим образом не связано с проявлением иммуностимуляции, в то время, как приобретенные сопровождаются мощной иммунной реакцией, которая может возникнуть, например, при введении в организм несовместимой крови. Именно эти особенности и объясняют практически полное отсутствие реакции на первую трансфузию при переливании пациенту несовместимой крови.

Приблизительно 60-65% собак имеют фактор А, аналогичный резус-фактору у человека. Повторная гемотрансфузия особи, у которой нет фактора А способна вызвать опасные последствия, гемолиз крови и летальный исход.

Иногда у некоторых пациентов после первого переливания крови диагностируются аллергические реакции (зуд, крапивница и т.п.), которые могут возникнуть как сразу, так и спустя некоторое время (ранняя и поздняя реакция, соответственно). Чтобы таких осложнений не было, перед процедурой необходимо делать пробные анализы, на основании которых можно сделать вывод о групповой и индивидуальной совместимости. Для этого в течение 3 минут осуществляется струйное переливание крови объемом 10-15 мл для собак крупных пород и 3-5 мл – мелких. Эта биологическая проба проводится трехкратно. Помимо этого, питомцу необходимо измерить артериальное давление, проследить частоту пульса, установить число дыхательных движений до переливания и через 10-15 минут после. На несовместимость укажут тахикардия или аритмия, явное беспокойство, одышка, снижение артериального давления, рвота, возникновение болевых ощущений в теле.

Окончательно убедиться в том, что красные кровяные тельца донора совместимы с реципиентом и в дальнейшем будут эффективно переносить кислород в организме, поможет перекрестная проба.

Группы крови у кошек

Главная группа крови у кошек состоит их трех типов и обозначается как АВ. Обладателями группы крови А в большинстве своем являются домашние коротко- и жесткошёрстные кошки. У них крайне редко с сыворотке крови можно наблюдать значительный уровень естественно возникающих антител. Что касается кошек с группой В, у них, наоборот, присутствует большое количество естественно возникающих антител к А-антигену, но кошки с такой группой крови встречаются очень не часто. Частота этих групп крови зависит от принадлежности особей к популяции породистых кошек, у которых на распределение групп крови оказали влияние методы селективного разведения пород.

Материал для переливания

Материал, пригодный для переливания животным, легче всего получить из свежей цельной крови. Именно поэтому она так широко применяется в ветеринарии при любых типах анемий, коагулопатии, как наследственной, так и приобретенной, а также при нарушениях функций тромбоцитов.

При переливании крови кошкам следует учитывать, что наиболее предпочтительной является именно свежая донорская кровь. Дело в том, что приготовленная заранее кровь уже по истечении 10 дней будет иметь кислую реакцию (рН до 6,0) и содержать высокую концентрацию калия (до 8 ммоль/л), что, в свою очередь, может привести к нарушению ритма сердца или даже его полную остановку. Холодная кровь провоцирует гипотермию миокарда, спазм периферических сосудов и ацидоз, поэтому если для переливания берется заранее заготовленная кровь, ее необходимо подогреть до +37°С на водяной бане.

Эритроциты консервируют, хранят охлажденными при температуре 3-6°С и применяют до истечения срока годности (30 дней) либо до момента, пока эритроциты не обесцветятся. Перед переливанием жидкость разводят и подогревают.

Эритромасса необходима для пополнения запаса эритроцитов (при состояниях хронической анемии), а также в ситуациях, когда у животного возникает риск перегрузки дополнительным объемом жидкости. Кроме того, она может быть использована в комбинации с кристаллоидами для лечения острой кровопотери.

Плазма необходима для восстановления факторов свертывания, в том числе и нестойких компонентов. Материал хранится при температуре -40°С в течение 1 года при сохранении активности факторов свертывания. Перед процедурой переливания ее необходимо нагреть в условиях температурного режима +30-37°С, а затем как можно скорее ввести в организм животного. Если плазма была получена более, чем через 5-6 часов после забора крови, то в ней еще присутствуют факторы свертывания, и она может быть использована в качестве источника альбумина. То же самое касается и свежезамороженной, неиспользованной в течение суток после оттаивания или хранившейся 1 год.

Способы введения

Кровь и ее компоненты в большинстве случаев вводятся реципиенту внутривенно. Второй способ – внутрикостные инфузии, такой способ актуален, когда ввести кровь в вену не представляется возможным (сильные отеки конечностей, гнойники на коже и т.п.).

Риски и осложнения

Осложнения, которые могут возникнуть вследствие гемотрансфузии у кошек и собак подразделяются на острые и замедленные, а также иммунные и неиммунные. Острые осложнения связаны с нарушением кислотно-щелочного состояния крови, нарушением гемодинамики, погрешностями в технике переливания крови, включающими в себя воздушную эмболию, острое расширение сердца, тромбозы и т.п. Замедленные осложнения связаны с переливанием инфицированной, гемолизированной или перегретой крови – гемолитический (посттрансфузионный) шок, анафилактический (цитратный) шок, развитие инфекционных заболеваний на фоне трансфузии инфицированной крови и т.п.

Из-за того, что в организме у собак содержится незначительное количество естественно возникающих антител, осложнения в острой форме возникают под влиянием сенсибилизации вследствие ранее проведенной несовместимой трансфузии. У кошек с кровью, несовместимой с АВ, наблюдаются опасные гемолитические реакции, вызванные появлением аллоантител. Вследствие того, что титр антител к А-антигену у кошек типа В выше, чем титр антител к В-антигену у кошек типа А, переливания, несовместимые по АВ, провоцируют более серьезные осложнения у особей типа В, чем у особей А-типа. Но объединяют эти оба вида последствия острой иммунной реакции – эритрофагоцитоз, гемоглобинурия, гемоглобинемия, лейкоцитоз со сдвигом влево. Клинически это проявляется гипотонией, беспокойством животного, слюнотечением, лихорадкой, рвотой, недержанием кала и мочи, реже – крапивницей и шоком со смертельных исходом.

В клинической практике известны случаи обратимой нефропатии у здоровых собак вследствие переливания и диссеминированной внутрисосудистой коагуляции, олигурической почечной недостаточности — у больных пациентов. При этом почечная недостаточность развивалась на фоне нефротоксичности свободного гемоглобина, превращающегося в солянокислый гематин в почечных канальцах. Как результат, он вместе с остатками разрушенных эритроцитов накапливался в просвете почечных канальцев, и возникало снижение почечного кровотока и клубочковой фильтрации.

Неиммунологические реакции в острой форме проявляются лихорадкой. Причина их возникновения кроется в реакции между антигеном и антителом (может купироваться самостоятельно), вовлекающей лимфоциты, гранулоциты или тромбоциты, или бактериальной контаминации крови. В некоторых случаях наблюдается аллергическая реакция в виде крапивницы с эритемой, сыпью и зудом, вызванная растворимым фактором в крови донора. Тахикардия, рвота, кашель, повышенная возбудимость, цианоз и одышка указывают на повышенную нагрузку на систему кровообращения, и ее можно избежать, если соблюдаются указания врача, касающиеся необходимой дозы вводимой крови, скорости введения и применения консервированных эритроцитов.

Имеют место и другие факторы риска, связанные с переливанием крови у собак и кошек:

• отек легких;
• лихорадки;
• трансмиссивные инфекции;
• посттрансфузионная циркуляторная перегрузка;
• острые постгемотрансфузионные реакции;
• гиперволемия;
• синдром полиорганной недостаточности и др.

Могут поражаться печень, легкие, эндокринные железы и другие органы и системы. Первое место отдается ДВС-синдрому, который развивается вследствие поступления в кровь тромбопластина из разрушенных красных кровяных телец в большом количестве.

Перегрузка вследствие переливания крови выражена в остром расширении и остановке сердца из-за быстрого и массивного вливания крови в венозное русло. Это приводит к тому, что правый отдел сердца просто не в состоянии перекачать всю идущую к нему кровь, и в правом предсердии, а также в системе полых вен кровь застаивается.

Переливание вызывает иммуномодулирующий эффект у питомца и увеличивает риск острого повреждения легких, развития нозокомиальных инфекций, аутоиммунных болезней в отдаленном периоде. Несмотря на то, что целью гемотрансфузии является повышение уровня гемоглобина в крови для доставки большего количества кислорода тканям, она увеличивает адгезию эритроцитной массы к эндотелию кровеносных сосудов реципиента и снижает кровоток в микроциркуляторном русле. Таким образом, в случае политравм переливанию должна предшествовать жидкостная инфузия.

Самым тяжелым осложнением, которое может возникнуть на фоне трансфузии, является анафилактический шок. Такая реакция объясняется изосенсибилизацией реципиента к иммуноглобулинам и если ее даже самые незначительные признаки начинают проявляться при переливании, то процедуру следует как можно скорее прекратить.

Переливание как методика лечения

Данная процедура как методика лечения домашних питомцев в ветеринарной практике в последние годы набирает все больший вес. Была документально подтверждена ее польза в рамках лечения некоторых гематологических заболеваний. Ветеринарные врачи смогли практически не придавать значения несовместимости групп крови у донора и реципиента, благодаря простой системе групп крови у собак и никому содержанию естественно возникающих изоантител. Что касается кошек, то здесь дело обстоит несколько иначе, ведь у них неблагоприятные реакции могут проявиться уже при первой процедуре переливания. Таким образом, необходимо четко устанавливать группы крови у кошек и проводить перекрестные пробы перед трансфузией.

Еще одной проблемой, связанной с выбор донора, является – потенциальная опасность заражения реципиентом инфекционными заболеваниями. Этическая сторона забора донорской крови заключается в том, что существует ограничение в количестве забираемой крови у животного без вреда для здоровья (10 мл/кг). Следующий забор должен осуществляться спустя 45-60 дней.

Статья подготовлена врачами терапевтического отделения «МЕДВЕТ»
© 2014 СВЦ «МЕДВЕТ»