Характер кристаллизации слюны при воспалительных заболеваниях слюнных желез. Получение препаратов кристаллограмм слюны. Цели, задачи и этапы исследования

04.04.2019Рубрика: Онкология

Феномен кристаллизации слюны - процесс увеличения количества гормонов эстрогенов на протяжении менструального цикла, сопровождаемый ростом выраженности кристаллизации слюны в виде " листьев папоротника " ("арборизация ", от латынского "arbor " - дерево)

С наступлением половой зрелости у девочки в яичниках начинается регулярное созревание фолликулов и образование в них яйцевых клеток, способных к оплодотворению. Когда яйцевая клетка полностью созрела, фолликул разрывается (этот процесс называется овуляцией) и освободившаяся яйцеклетка, готовая к оплодотворению, попадает по маточной трубе в матку. Овуляция наступает у здоровой девочки или женщины посредине между двумя менструациями, обычно на 14-16 день от 1-го дня последней менструации (при 28-30-дневном цикле). На месте разрыва фолликула в его полости происходит небольшое кровоизлияние. Клетки на внутренней поверхности стенки разорвавшегося фолликула начинают размножаться и изменяют свою окраску в желтый цвет. Поэтому это образование называют желтым телом.

Если яйцеклетка не оплодотворилась и погибла, желтое тело скоро увядает. Наступает следующая менструация. После исчезновения желтого тела в яичнике начинает созревать новый фолликул, снова происходит овуляция и вновь образуется желтое тело. Такое чередование созревания фолликула и образования желтого тела происходит периодически до тех пор, пока не произойдет оплодотворение яйцеклетки, что вызовет наступление беременности и временное прекращение менструаций.

При созревании фолликула в яичнике образуются эстрогенные гормоны (эстрогены), а при развитии желтого тела - прогестерон. Последовательность действия гормонов во время менструального цикла показана на рисунке.

Овуляция делит цикл на две фазы: фазу созревания фолликула, или фолликулиновую (12-16 дней), и фазу желтого тела, или лютеиновую (10-14 дней).

Как уже отмечалось, длительность менструального цикла у каждой женщины своя (различна) и с течением времени (с возрастом) может изменяться. Бывают короткие циклы (21-24 дня), средние (25-30 дней) и длинные (31-35 дней). Длительность цикла зависит от продолжительности созревания фолликула.

Согласованное функционирование описанного механизма играет важную роль не только в становлении женского организма, но и в наступлении беременности, ее течении, переходе женщины из репродуктивного периода жизни в менопаузальный, а также в плане возможности развития ряда гормонозависимых опухолей (как доброкачественных, так и злокачественных).

Гормональное состояние женщины характеризуется правильным соотношением половых гормонов на разных стадиях менструального цикла. В первой половине цикла количество эстрогенных гормонов медленно растет и достигает максимума в день, предшествующий выходу созревшей яйцеклетки (овуляция). Затем в течение 1-го - 2-х дней количество эстрогенов спадает. Вторая половина цикла характеризуется наличием другого гормона - прогестерона.

Процесс изменения количества эстрогенов сопровождается ростом выраженности кристаллизации слюны (феномен кристаллизации слюны или арборизация ), которая начинает проявляться у здоровой женщины за 6-7 дней до дня овуляции, достигая максимума в день овуляции (этот день соответствует максимальной выраженности кристаллизации - появлению «листьев папоротника»). Таким образом, наблюдая в тест-микроскоп за выраженностью кристаллизации слюны, мы можем судить о соотношении гормонов (эстрогенов и прогестерона) и выявить, на какой день цикла приходится выход яйцеклетки.

Длительность существования каждой микроскопической картины и смена ее другой у каждой здоровой женщины должны быть строго определенными, регулярно повторяющимися в зависимости от продолжительности ее менструального цикла. При продлении (затягивании) одной картины или отсутствии ее смены другой («переживании» феномена «арборизации»), т. е. если кристаллизация слюны не уменьшается через 14-15 дней менструального цикла или даже продолжает наростать, а также в случае, если выраженность кристаллизации приобретает волнообразный характер, следует заподозрить нарушение функций яичников и обратиться к врачу. Это позволит своевременно диагностировать ряд заболеваний, осуществить коррекцию гормональной функции и предупредить развитие более серьёзных нарушений.

Проведя в течение 1-2-х месяцев наблюдения за характером изменения кристаллизации Вашей слюны Вы сможете не только определить продолжительность Вашего цикла но и установить за сколько дней до выхода яйцеклетки в Вашей слюне появляются первые кристаллы. Тем самым в любом из последующих циклов, используя полученную и занесенную в таблицу информацию, Вы сможете прогнозировать день овуляции как только появятся первые признаки кристаллизации.

А. К. Мартусевич

КРИСТАЛЛОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ: ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

Кировская государственная медицинская академия (Науч. рук. - д. м. п., профессор Н. Ф. Камакин)

Кристаллизация биологических жидкостей организма - генетически обусловленный про цесс, связанный с наличием в них определенных органических и неорганических компонентов . Это достаточно любопытное их свойство до пос леднего времени оставалось без внимания. Лишь, начиная с 80-х годов, в литературе стали появляться подобные исследования . Они брали начало из работ Т. Е. Ловица , ко торые предложил два оригинальных метода ана лиза: «метод микрокристаллических реакций» и «выветренных солей». Они легли в основу буду щих экспериментов. Первоначально методики нашли применение в фармации , а затем и в судебной медицине . Значительно позже крис таллизация стала восприниматься как диагнос тический тест. В этом плане наибольший вклад внесли сотрудники Московского областного научно-исследовательского клинического институ та им. М. Ф. Владимирского. Ими была разра ботана методика кристаллоскопического анали за биологических субстратов, которая по сути представляла собой тезиграфический тест . По данному способу изучены уже сыворотка крови, моча, слюна, назальный секрет, ликвор, биопта- ты с различных органов, дуоденальное содержи мое и другие, однако эти исследования содержат определенные недостатки (отсутствие системно го подхода, привязка к конкретным условиям проведения диагностики, рассмотрение одного диагностического принципа и т. д.) .

Работы, посвященные исследованию биожид костей человека методом «классической» крис таллоскопии, встречаются в литературе доста точно редко . Причем их особенностью является использование для диагностики сыво ротки крови, что позволяет отнести такой спо соб применения к инвазивным.

В связи с таким разнообразием методических подходов необходимо систематизировать их и выяснить наиболее эффективные из них.

Целью исследования являлось выяснение применимости кристаллографических методов в отношении некоторых нормальных и патологи ческих состояний организма человека, а также изучение стандартных картин, полученных при подготовке микропрепаратов по способам «классической» кристаллографии и тезиграфии.

Материал и методы исследования

В качестве основного метода была примене на разработанная нами тезиокристаллография. Она включала в себя совместное использование «классической» кристаллографии и тезиграфии, что повышает информативность проводимого анализа. В качестве кристаллообразующего ве щества при тезиграфии использовался 0,9% ра створ №0. Материалом исследования были слюна, моча, слеза и пот 150 здоровых людей и сыворотка крови и моча 160 лиц с различной па тологией (бронхолегочные заболевания, нару шения пищеварительной и нервной системы). Высушивание микропрепаратов производилось модифицированнным ускоренным способом в токе теплого воздуха (при температуре 56,8+12,1°С; влажности 24,0±3,4%; время подго товки пробы в этих условиях составляло 0,24+0,03 часа). Объем наносимой биожидкости составлял 0,3+0,05 мл. Оценка полученных кри- сталлограмм и характеристика количественного и качественного состава образцов производи лась по идентификационной таблице. Подсчет структур и центров в целях повышения точнос ти исследования проводился в трех полях зре ния, причем в качестве диагностического прини малось среднее между ними округленное до це лого значение.

Для оценки данных тезиграфии вводился ко эффициент Q, отражающий соотношение коли чества центров кристаллизации в обоих образ цах: Q=A/B, где А - количество центров крис таллизации в экспериментальной пробе, В - ко личество центров кристаллизации, образовав шихся при высушивании стандартного раство ра. Именно с помощью данного коэффициента, по нашему мнению, станет возможным проведе ние диагностики и дифференциальной диагнос тики различных заболеваний. Кроме того, его использование позволяет нивелировать погреш ности от воздействий, связанных с условиями проведения лабораторной диагностики (темпе ратура в помещении, влажность, температура потока воздуха при сушке).

Полученные результаты и их обсуждение

Для интерпретации кристаллоскопических картин мы проклассифицировали все встречае мые нами кристаллические и аморфные образо вания (таблица № 1, схема). В соответствии с данной классификацией и проводилась оценка препаратов, подготовленных для анализа по ме тодике «классической» кристаллоскопии. Про изводилось как общее изучение кристаллоскопи ческих особенностей биожидкости, так и срав нительная их характеристика.

СТРАНИЧКА МОЛОДОГО УЧЕНОГО

Всем основным биожидкостям организма свойственно образование кристаллической кар

тины, отличающейся следующими особенностя ми. Высыхание капли слюны на смачиваемой поверхности (стекло) приводит к образованию 3 различных зон: наружная (маргинальная), обус ловленная мобильной составляющей слюны (вода, электролиты, низкомолекулярные соеди нения); внутренняя (центральная), структура ко торой соответствует коллоидной части слюны (в мукоиде сосредоточены высокомолекулярные белки, электролиты, низкомолекулярные соеди нения) и промежуточная, отличающаяся наи меньшей концентрацией веществ. Внутренняя зона может иметь выраженные и невыраженные границы. Часто к внешнему контуру внутренней границы примыкают кристаллические и аморф ные структуры.

Высыхание коллоида сопровождается его ретракцией, нарастанием концентрации низко молекулярных соединений и образованием кри сталлических структур самого разного вида.

Такое распределение составных частей био жидкостей наиболее характерно для слюны, дру гие же имеют свои индивидуальные особенности (таблица №2).

По представленным в таблице данным оче-, видно, что каждая из исследованных биожидко стей имеет свои особенности кристаллоскопи- ческой картины, что может быть объяснено вы ведением ими различных веществ. Так, наиболь шее общее количество кристаллов наблюдается в слюне и поте, однако качественное соотноше ние их варьирует. Если для слюны характерно значительное преобладание пластинчатых пря моугольников, то основные составляющие кар тины пота - пирамиды и октаэдры. Это свиде тельствует том, что роль в экскреции холестери на саливарного пути больше, чем его выделение с потом, в то время как выведение фосфатов кальция и магния выявляет обратную законо мерность. Возможно, данный факт объясняется большим количеством выделяемой слюны отно сительно объема экскретированного пота в спо койном состоянии у практически здоровых лиц. Выведение данным путем фосфатов может быть связано с нагрузкой, как физической, так и эмо циональной. Присутствующие в составе мочи октаэдры, являющиеся по химической природе фосфатом кальция, на наш взгляд, выполняют ту же функцию.

Дендритная картина биожидкостей в значи тельной степени дифференцирована. Соотноше ние данных структур, как и одиночные кристал лы, несет диагностическую нагрузку. Так, боль шое количество фигур «лук» и «комета», пред ставляющих собой оксалат кальция, указывает на совместную экскрецию с кальцием углекисло го газа, одного из терминальных метаболитов дыхательной цепи.

В отношении аморфных образований наблю дается различие в размерах частиц и их количе стве. Эти характеристики демонстрируют сте пень участия данного пути в экскреции углекис лого газа и кальция.

Кроме исследований, посвященных изучению кристаллоскопической картины у здоровых лю дей в спокойном состоянии, нами были проведе ны эксперименты по рассмотрению влияния фи зических и эмоциональных нагрузок на количе ство и качественный состав получаемых препа ратов. В результате данной группы опытов нами выделены следующие тенденции.

Для физической нагрузки было характерно кристаллоскопически значимое выделение ионов Са2+ и М^2+, фосфат-ионов, что в свою очередь дало отражение в образующейся кар тине. Соотношение данных ионов существенно зависело от уровня подготовленности испытуе мого.

В качестве примера возможного применения этих методик проиллюстрируем проведение ди агностики и дифференциальной диагностики на различных формах и стадиях панкреатита. Так, нами изучались кристаллические картины боль ных острым и хроническим панкреатитом, пан креатитом в период реконвалесценции. По обо им тестам имеет место дифференциация (табли ца № 3). При анализе полученных данных изуча лась также динамика изменения результатов кристаллоскопического теста в процессе разви тия и лечения заболевания (диаграмма).

В соответствии с вышеприведенной диаграм мой прослеживаются изменения соотношения и количества кристаллов в зависимости от формы и стадии заболевания. Таким образом, различия в кристаллоскопической картине указывают на возможность диагностики и дифференциальной диагностики панкреатита.

Из данной таблицы можно видеть, что на блюдаются значительные отличия по всем ос новным группам кристаллических и аморфных структур. Следовательно, метод «классической» кристаллоскопии дает достаточно оснований, чтобы с определенной степенью точности поста вить предварительный диагноз панкреатита, а также установить форму или стадию заболева ния. Кроме того, по изменениям кристаллоско пической картины, на наш взгляд, представляет ся возможным определить некоторые метаболи ческие сдвиги ионного гомеостаза в организме.

Тезиграфический тест дал следующие резуль таты (таблица № 4).

Очевидно, что тезиграфическое исследова ние, как и кристаллоскопическое, показывает зна чительные различия по используемому коэффици енту данных заболеваний. При этом дифференци ация по коэффициенту Q достаточно четкая, о чем свидетельствуют достоверные отличия между ними (р<0,01). Следовательно, анализируемый метод является подходящим в качестве быстро го и эффективного диагностического теста.

1.Организм человека можно представить как со вокупность кристаллоскопических картин его био жидкостей (слюны, мочи, сыворотки крови, слезы, пота, ликвора и других);

2.каждой биожидкости организма человека свой ственны определенные кристаллоскопические призна ки (наличие или отсутствие вышеуказанных струк тур);

3.физическое и эмоциональное напряжение могут менять кристаллоскопическую картину в сторону уве личения содержания компонентов, являющихся по химической природе фосфатами кальция и магния или карбонатом кальция;

4. выявлены характерные паттерны в отношении «классической» кристаллографии и тезиграфии для различных форм и

стадий панкреатита.

Литература

\. Я. 3. Ильясов. Судебно-медицинская эксперти за. - 1966. -№ 4. - С. 43.

2.Д. Б. Каликштейн, Л. А. Мороз, Н. Н. Квитко, Н. Е. Шмелева, Б. А. Павлов. Кристаллографическое исследование биологических субстратов // Клиничес кая медицина. - 1990. -№ 4. - С. 28-31.

3.Д. Б. Каликштейн, Л. А. Мороз, В. Л. Черняков. Значение тезиграфического метода исследования мочи // Лабораторное дело. - 1981. - № 2. - С. 79-81.

4.Кристаллоскопический метод исследования биологических субстратов: Метод, рекомендации / Л. А Мороз. И. Л. Теодор, В. Е. Брык и др. - М., 1981. -9 с.

5.Т. Е. Ловиц.Технол. журнал. - 1804. - Т. 1, № 3. -С. 27.

6.М. Н. Никольская. Аптечное дело. - 1961. - № 6. -С. 42.

7.М. Н. Никольская, В. Г. Гандель, В. А. Попков. Аптечное дело. - 1965. - № 4. - С. 63.

8.Г. В. Плаксина, Г. В. Римарчук, С. В. Бутенко, Л. Н. Горчакова. Клиническое значение кристалло графического и кристаллоскопического метода иссле дования мочи // Клиническая лабораторная диагнос тика. - 1999. -№ 10. - С. 34.

9.Ю. П. Поте хина, П. С. Зубарев, А. В. Страхов, М. Э. Бузоверя, Т. А. Яхно, Ю. П. Щербак. Кристал лография и вискозиметрия желчи при желчнокамен ной болезни // Клиническая лабораторная диагности ка. - 2001.-№ 3. - С. 33-35.

10.Савина Л. В. Структурообразование сыворот ки крови в условиях вакуума // Клиническая лабора торная диагностика. - 1999. - №11. - С. 48.

11.Савина Л. В., Конуева О. В., Коротько Г. Г., Яковенко М. С., Новоселя Н. В. Кристаллоскопичес- кая диагностика нарушений экзокринной функции поджелудочной железы у больных с хроническим панкреатитом / IV Международный конгресс «Парен теральное и энтеральное питание». - Москва, 2000. - С. 98.

12.С. Н. Шатохина, В. Н. Шабалин. Профильная дегидратация биологических жидкостей // Клиничес кая лабораторная диагностика. - 1999. - № 9. - С. 38.

13.Daems W. F. - Р. Ж. Биол. химия. - 1965. - № 9. - С. 4-5.

14.Daems W. F. Thesigrafie. - Chem. courant. - 1964, 1963, 1970, 1977.

Таблица № I

Кристаллические и аморфные структуры, встречаемые при «классическом» кристаллоскопической! анализе __биожидкостей организма человека__

1. Одиночные кристаллы Пластинчатые прямоугольники Холестерин и его производные

Октаэдры Са3(Р04)2

Призмы Mg3(P04)2

Пирамиды Са3(Р04)2

2. Кристаллические фигуры (дендриты) Пластинчатые прямоугольники

Линейчатые дендриты с утлом расхождения 90" и 120°

Пластинчатые «кресты»

Фигуры «мох»

Фигуры «папоротник»

Фигуры «комета» Са(С204)2

Фигуры «лук» Са(С204)2

Фигуры «хвощ»

Таблица № 1

Тип образований Структура Химическая природа

пластинчатые (обычно 6 лепестков) Производные холестерина

листовидные (обычно 6 №НС03

лепестков)

3. Дендритоидные структуры Нитевидные

Дихотомически ветвящиеся

Цепочечные

4. Особые структуры Дендритоподобные мелко- и крупноячеистые сетки

Параллельные

Субпараллельные

Сфероидные камеры с дендритами

Реликтовые микротипы

5. Аморфные образования Обычно СаСОз

Примечание: * - различаются по количеству (немного, умеренное количество, большое количество) и по размеру (мелкие, средние, крупные, агрегаты).

Схема. Взаимодействия кристаллических и аморфных структур.

Тип взаимодействий

Налипание Оттеснение

Страничка молодого ученого Таблица № 2

Кристалл Структуры оскопическая характеристика биож Слюна кидкостеи организма человека | Моча имеются только приводимые Слеза структуры) Пот

1. Одиночные кристаллы Прямоугольники - 4, призмы - 2, пирамиды - 1 Прямоугольники - 1, призмы - 0-1, октаэдры - 2 Прямоуголь ники -2-3, пирамиды - 3, Октаэдры - 1 Прямоуголь ники - 0-1, пирамиды -3, октаэдры - 3-4, призмы - 1

2. Дендриты Линейчатые - 1, «кресты» -0-1, «мох», «лук», «комета» - 2-3, прямоутольники-0-1 Линейчатые - 0-1, прямоугольники - 0-1, «мох», «лук», «комета» - 2-3 Линейчатые - 0- 1, прямо угольники -0-1, «хвощ» - 2, «розетки» - 2-3 Линейчатые - 2-3, « лук» - 2, прямоуголь ники -1

3. Аморфные образования Средние, среднее коли-чество Крупные, мало Крупные, среднее коли чество Средние, среднее ко личество

4. Взаимо действие кристаллов и аморфных образований Налипание Оттеснение Налипание Налипание

Таблица № з

Кристаллоско Структуры пическая картина мочи у больных панк Острый панкреатит реатитом | указаны наи Панкреатит ценция) более диагностич (рековалес- ески важные показатели) Хронический панкреатит

1. Одиночные Прямоугольник - 2, призма - Прямоугольник - 1, призма - Прямоугольник - 2, призма -

кристаллы 2, пирамида - 1 3, пирамида - 2 1, пирамида - 2

2. Дендриты Прямоугольник - 2, линейчатые - 2, «мох» - 1, «кресты» - 0 Прямоугольник - 1, линейчатые - 1, «мох» - 0, « кресты» - 1 Прямоугольник - 3, линейчатые - 0, «мох» - 0, «кресты» - 0

3. Аморфные образования Мелкие, мало Средние, среднее количество Мелкие, мало

4. Тип взаимо действия Налипание Налипание Оттеснение

Таблица № 4

Тезиграфическин анализ проб мочи больных панкреатитом

Стадия или форма заболевания Количество центров кристаллизации

NaCl+мочэ NaCl Q

Острый панкреатит 150±33 200±21 0,753±0,067

Панкреатит (реконвалесценция) 60±7 200±21 0,328±0,041

Хронический панкреатит 15+2 200±21 0,075±0,006

Примечание: различия между коэффициентами р достоверны (р<0,05) прямоугольники (дендриты) --*- линейчатые

дендриты - - "кресты "

Динамика изменения к р и с т а л л о с к о п и ч е с к о й картины с течением заболевания

■ прямоугольники

Пирамиды

CRYSTALLOGRAPHIC ANALYSIS: COMMON CHARACTERISTIC

Martusevich A. K.

Kirov State Medical Academy Chair of normal physiology

The crystallization of the biological fluids is a multiplex process of movings of high and low molecular substances and dehydration. In this process three zones of crystallographic picture are formed. There are central, intermediate and marginal zones.

Specimens of urine, blood and saliva were investigated in 150 healthy people and 160 patients with different pathology (diseases of nervous, respiratory systems etc).

The results of biological fluid crystallization were identified with special table and the analyses of these specimens were done by teziocrystalloscopic test.

It has been determined that there are differences between crystallogramms of the human fluids of healthy and sick patients. Crystallographic analysis can be used for primary diagnostics.

Специальность ВАК РФ14.00.05
Количество страниц 128

Диссертация добавить в корзину 500p

Глава 2. Актуальные проблемы диагностики и контроля эффективности лечения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Особенности кристаллографии слюны при гастродуоденальной патологии (обзор литературы).

2.1 Инструментальное определение дефекта слизистой оболочки при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки.

2.2 Морфологическая диагностика фазы воспаления при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки.

2.3 Современное состояние диагностики инфекции Helicobacter pylori.

2.4 Возможности применения кристаллографии слюны в диагностике и оценке эффективности лечения язвенной болезни.

Глава 3. Объем и методы исследования.

Глава 4. Особенности кристаллографической картины слюны при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки.

Глава 5. Обсуждение результатов исследований.

Глава 6. Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему "Кристаллография слюны в диагностике и контроле эффективности лечения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки"

Проблема язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки является одной из наиболее актуальных в современной гастроэнтерологии.Язвенная болезнь относится к наиболее распространенным заболеваниям пищеварительной системы - не менее 8% взрослого населения России страдает язвенной болезнью. Эта болезнь поражает людей в наиболее активном творческом возрасте, часто обусловливая временную, а порой и стойкую нетрудоспособность (16).Данные мировой статистики свидетельствуют, что язвенная болезнь является одним из наиболее часто встречающихся заболеваний внутренних органов. На протяжении жизни язвенную болезнь переносят около 10% мужчин и 5% женщин земного шара. Однако возможность ранней диагностики язвенной болезни, особенно на догоспитальном этапе, ограничивается инвазивностью исследования, а также нецелесообразностью проведения повторных частых эндоскопии при хронизации процесса.Одним из основных этиологических факторов развития хронического активного гастрита и важнейшим фактором патогенеза хронической язвы двенадцатиперстной кишки в настоящее время признана инфекция Helicobacter pylori (112, 114, 164) - постулат «без кислоты нет язвы» сменился постулатом «без кислоты и Helicobacter pylori нет язвы» (113). Большинство специалистов согласны с тем, что в последние 50 лет открытие Helicobacter pylori было «одним из прорывов» в области гастроэнтерологии (156).Несмотря на большое разнообразие методов диагностики инфекции Helicobacter pylori, применяемых при заболеваниях желудка и двенадцатиперстной кишки, ценность их недостаточна, высока стоимость исследований и мала доступность для широкой амбулаторной практики, кроме того трудна диагностика эрадикации Helicobacter pylori.Все вышеперечисленное дает основание к разработке доступных неинвазивных методов диагностики язвенной болезни, инфекции Helicobacter pylori и контроля за ее эрадикацией (10).Одной из заметных тенденций медицины последних лет является активная разработка и внедрение в практику неинвазивных методов диагностики, что определяется, в основном, стремлением получить диагностическую информацию о важнейших функциях организма «бескровным» путем и по возможности без нарушения естественных барьеров (48, 86). Прежде всего, это связано с необходимостью проведения скрининговых исследований для выявления патологических состояний на ранних стадиях их развития (87).На протяжении последних лет в клинической медицине все более широко применяются кристаллографические методы исследования различных биологических субстратов. Перспективность использования этих методов определяется их высокой информативностью, поскольку характер кристаллизации вполне достоверно отражает особенности патологических процессов, происходящих в организме, что дает возможность проведения быстрой и ранней диагностики заболеваний (62).С современных позиций при заболеваниях происходят качественные и количественные изменения состава различных биологических жидкостей, что проявляется в характере их пространственно-временной структуризации при высыхании.К настоящему времени кристаллографический метод нашел применение в диагностике заболеваний центральной нервной системы с использованием в качестве биологического субстрата спинномозговой жидкости (52), в диагностике патологических изменений предстательной железы по характеру кристаллизации мочи, болезней крови и обмена веществ по особенностям кристаллизации сыворотки крови (44, 74).В МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского разработана программа последовательного использования кристаллографических методов при обследовании пациентов: от экспресс-теста «здоров-болен» до комплексного исследования твердо- и жидкокристаллических структур при гастроэнтерологической патологии. С этой целью Г.В. Плаксина и Г.В. Римарчук (1995) используют в качестве биологического субстрата слюну при заболеваниях желудочно-кишечного тракта.По результатам 10-летних исследований ими доказано, что воспалительный процесс при гастродуоденобилиарной патологии характеризуется наличием в кристаллограмме слюны центров кристаллизации с радиально или кругообразно расходящимися лучами.Однако имеются лишь единичные работы, касающиеся диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта с исследованием кристаллизации слюны в терапевтической практике.Целесообразность использования слюны в качестве объекта исследования объясняется ее сложной физиологической ролью в организме благодаря участию в регуляции постоянства внутренней среды, а также доступностью получения диагностического материала (1, 39, 62, 178).Несмотря на достигнутые успехи в области клинической кристаллографии, следует констатировать, что единых стандартов еще не выработано и не раскрыты все возможности данных методов исследования. Для решения этих задач требуется согласованное понимание физикохимических механизмов, определяющих процессы структурообразования биожидкостей (65).Цель работы Разработка новых неинвазивных способов диагностики, основанных на кристаллографии слюны, в лечении язвенной болезни двенадцатиперстной кишки.Задачи 1. Установить возможность определения дефекта слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки при язвенной болезни с помощью кристаллографии слюны и на основании полученных результатов разработать способ диагностики язвенной болезни двенадцатиперстной кишки.2. Выявить изменения активности воспалительного процесса при хроническом гастродуодените с использованием кристаллографии слюны.3. Разработать способ оценки фазы воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки при язвенной болезни, основанный на кристаллографии слюны.4. Разработать саливарные кристаллографические критерии диагностики инфекции Helicobacter pylori в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки.Научная новизна работы Впервые установлено: - при язвенном дефекте слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки в кристаллограмме слюны обнаруживаются кристаллы с дефектами наполнения, в 77,4% случаев подтвержденные эндоскопическими и гистологическими исследованиями; - определенным фазам развития воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки соответствуют характерные изменения кристаллографии слюны, подтвержденные морфологическими исследованиями; - наличие Helicobacter pylori в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки характеризуется присутствием в кристаллограмме слюны центров кристаллизации с радиальными лучами или кругообразными структурами, с высокой степенью достоверности подтвержденное стандартными методами диагностики инфекции Helicobacter pylori.Практическая значимость работы 1. Разработан неинвазивный способ диагностики язвенной болезни двенадцатиперстной кишки с использованием кристаллографии слюны, позволяющий повысить эффективность диагностики язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки (Патент от 20.12.2002 года №2194985).2. Разработан неинвазивный способ диагностики инфекции Helicobacter pylori в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки с применением кристаллографии слюны, позволяющий позволяющий повысить эффективность диагностики хронического гастродуоденита и язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки и контролировать эффективность эрадикации Helicobacter pylori в динамике лечения (Патент от 27.02.2003 года №2199743).3. Разработан неинвазивный способ определения фазы хронического гастродуоденита и язвенной болезни на основе кристаллографии слюны, позволяющий повысить эффективность лечения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки за счет определения динамики течения заболевания и возможности корректировки проводимой терапии (Положительное решение на выдачу патента от 11.09.2000 года №2000123418/14 (024842).Основные положения, вынесенные на защиту Кристаллография слюны позволяет косвенно выявлять дефект слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки при язвенной болезни как дополнительный метод к применению эндоскопии.Метод кристаллографии слюны позволяет оценить активность воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки, что подтверждается морфологическими исследованиями.Уникальной способностью кристаллографии слюны является возможность выявлять инфекцию Helicobacter pylori (HP) и контролировать ее эрадикацию в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Воробьев, Александр Викторович, 2004 год

1. Автандилов Г.Г. Введение в количественную патологическую морфологию. - М.: Медицина, 1980. - 216 с.

2. Антропова И.П., Габинский Я.Л. Кристаллографическое исследование слюны больных острым инфарктом миокарда// Кристаллографические методы исследования в медицине: Мат. науч.-практ. конф. -М., 1997.-С. 54-57.

3. Аруин Л.И. Роль Helicobacter pylori в формировании морфологического субстрата язвенной болезни// 8-я сессия Росс, группы по изучению Н. pylori: Мат. науч.-практ. конф,- Уфа, 1999.- 7-11.

4. Аруин Л.И., Исаков В.А. Гастроэзофагальная рефлюксная болезнь и Helicobacter pylori// Клин. мед. - 2000. - №8. - С 34-35.

5. Аруин Л.И., Капуллер Л.Л., Исаков В.А. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника. - М.: Триада-Х, 1998- 483 с.

6. Баранская Е.К. Язвенная болезнь и инфекция Helicobacter pylori// Болезни органов пищеварения. - 2000. - №1. - 8-14.

7. Белоусова Е.А. Блокаторы Н2-гистаминовых рецепторов в гастроэнтерологии// Гедеон Рихтер в СНГ.- 2000.- № 3.- 14-7.

8. Верткин А. Л., Машарова А. А. Лечение язвенной болезни в современной клинике// Лечащий врач,- 2000.- №8. - 14-19.

9. Гисто-гематические барьеры/ Под ред. Л.С. Штерн. - М.: АН СССР, 1961.-406 с.

10. Голяницкий И.А. К вопросу о внутренней секреции слюнных желез и ее клиническом значении// Врач. дело. - 1924. - № 20-23. - 1203-1208.

11. Григорьев П. Я., Яковенко Э. П., Агафонова А. и др. Пилорический ге- ликобактериоз: диагностика, лечение// Лечащий врач.-2002.-№6.- 3-8.

12. Григорьев П.Я., Яковенко А.В. Клиническая гастроэнтерология. - М., 2001.-693 с.

13. Губачев Ю.М., Симаненков В.И. Болезни системы пищеварения. - СПб.: Папирус, 2000.- 54 с.

14. Домарадский И.В., Исаков В.А., Тамасаускас А.А. Внежелудочные эффекты H.pylori: продолжение инфекционного "ренессанса"// Гастроэнтерология, гепатология и колопроктология. - 2000. - Том X. -№2. - Приложение №10. - 16-22.

15. Задионченко B.C., Кольцов П.А. Поликлиническая гастроэнтерология. -М., 1998.-325 с.

16. Зайчик В.Е., Багров Ш.Т. Содержание химических элементов в смешанной нестимулированной слюне здорового человека// Стоматология. - 1991. - Т. 70.- № 1. - 14-17.

17. Ивашкин В. Т. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно - кишечного тракта. - М: МЕДпресс -информ, 2002. - 127 с.

18. Ивашкин В.Т., Лапина Т.Л. Гастроэнтерология XXI века// Росс. мед. журн.- 2000.- №17.- 697-703.

19. Ивашкин В.Т., Мегро Ф., Лапина Т.Л. Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии. - М., 1999. - 255 с.

20. Ивашкин В.Т., Рапопорт СИ. Справочник практического врача по гастроэнтерологии. - М., 1999. - 347 с.

21. Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Избранные лекции по гастроэнтерологии. - М.: Медпресс-информ, 2002.- 84 с.

22. Ивашкин В.Т., Шептулин А.А., Макаров Ю.С., Немытин Ю.В.. Сравнительная оценка антисекреторной активности лосека МАПС, париета и нексиума у больных язвенной болезнью// Клинические аспекты гастроэнтерологии, гепатологии,- 2002.- №5.- 13.

23. Исаков В. А, Щербаков П. Л. Комментарии к Маастрихтскому соглашению// Диагностика и лечение заболеваний, ассоциированных с Н. pylori: Мат. межд. симп.- М., 2002. - 5-7.

24. Исаков В.А. Ингибиторы протонного насоса: их свойства и применение в гастроэнтерологии. - М.: Академкнига, 2001.- 304 с.

25. Калинин А.В. Язвенная болезнь: от патогенеза к лечению// Фамате- ка.- 2000.- №9.- 64-73. *

26. Кассиль Г.Н. Проблема гомеостаза в физиологии и клинике// Вестник АМН СССР. - 1966. - № 7. - 64-68.

27. Кокуева О. В., Степанова Л. Л., Усова О. А. и др. Фармакотерапия язвенной болезни с учетом сопутствующей патологии желудочно-кишечного тракта// Экспериментальная и практическая гастроэнтерология.- 2002.- №1. - 49-52.

28. Кокуева О.Л., Савина Л.В. Кристаллоскопическое исследование сыворотки крови в диагностике хронического панкреатита в сочетании с заболеваниями желчевыводящих путей// Клиническая медицина. - 2000.-№4.-С. 48.

29. Колтунов С. Течение язвенной болезни двенадцатиперстной кишки при использовании различных видов противорецидивного лечения: Автореф. дисс. канд. мед. наук. - Хабаровск, 2000. - 21 с.

30. Комарова Л.Г. Биохимические параметры крови и слюны при язвенной болезни у детей// Вопросы охраны материнства и детства. - 1988.-Т. 33.-№7.-С. 13-16. из

31. Комарова Л.Г., Алексеева О.П. Новые представления о функции слюнных желез в организме. Клинико-биохимические аспекты. -Н.Новгород, 1994. - 145 с.

32. Кононенко Е.В. Морфотесты и физика роста реальных кристаллов из многокомпонентной среды// Кристаллографические методы исследования в медицине: Мат. науч. конф. - М., 1997. - 18-20.

33. Коркоташвили Л.В., Комарова Л.Г. Биохимические параметры слюны здорового ребенка// Лаб. дело. - 1988. - № 12. - 22-23.

34. Корсунский А.А. Инфекция Helicobacter pylori в педиатрической практике// Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии. - М., 1999.-255 с.

35. Кунгуров Н.В., Кохан М.М., Кононенко Е.В., Филимонкова Н.Н., Ярвиц А.А. Кристаллографические исследования биологических жидкостей у больных хроническими дерматитами. - Екатеринбург, 1997.-41 с.

36. Курилович А, Шлыкова Л.Г., Копычко Т.А. Реальные проблемы Нр-эрадикации// Гастроэнтерология, гепатология и колопроктоло-гия. - 2000. - Том X. - № 5. - Приложение № 11. - 25.

37. Лапина Т. Л., Ивашкин В. Т. Современные подходы к лечению язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки// Рус. мед. журн.- 2001.- Т. 3.- № 1.- 10-15.

38. Лисиенко В.М., Запецкий Е.В., Кононенко Е.В., Минц Р.И. Экстракорпоральная жидкокристаллическая диагностика холецистита. - Свердловск, 1999. - 100 с.

39. Лопухин Ю.М. Неинвазивные методы определения эпидермального холестерина в диагностике атеросклароза. - М.: ГЭОТАР Медицина, 1999.-165 с.

40. Маржатка 3. Эндоскопия пищеварительного тракта: номенклатура OMED (Organisation Mondiale d"Endoscopic Digestive). - Международное медицинское издательство, 1996.-231 с.

41. Меркулов Г.А. Основы патогистологической техники. - М., 1969. - 245 с.

42. Минушкин О. Н. Место современных антацидных препаратов в лечении кислотозависимых заболеваний// Лечащий врач.- 2001,- № 5-6.- 8-10.

43. Неретин В.Я., Кирьяков В.А. Кристаллографический метод исследования спинномозговой жидкости при заболеваниях центральной нервной системы// Советская медицина. - 1977. - №5,- 96.

44. Нетахата Ж.Н., Ляпун Н. Изучение саливации у человека в норме и при патологии// Клин, медицина. - 1972. - Т. 50.- № 9. - 15-22.

45. Нурмухамедова Е. А. Антациды и антагонисты Н2-рецепторов в лечении изжоги// Consilium provisorum,- 2001.- Т. 1.- № 2.- 10-14.

46. Окороков А.Н. Диагностика болезней внутренних органов. - М.: Мед. лит., 1999.- 350 с.

47. Павлов И.П. Полное собрание сочинений. - М. - Л.: АН СССР, 1952. - Т. 5.-865 с.

48. Пайков В.Л., Хацкель СБ., Эрман Л.В. Гастроэнтерология детского возраста в схемах и таблицах. - -Пб., 1998. - 421 с.

49. Пасечников В.Д., Чуков З. Значение геномной гетерогенности штаммов Helicobacter pylori в развитии ассоциированной патологии гастродуоденальной зоны// Гастроэнтерология, гепатология и коло-проктология.- 2000.- №3.- 7-11.

50. Петрович Ю.А. Селективная проницаемость//Гисто-гематические барьеры и нейро-гуморальная регуляция/ Под ред. О.Г. Газенко. - М.: Наука, 1981.- 67-71.

51. Пиманов СИ. Эзофагит, гастрит и язвенная болезнь. - Н.Новгород, 2000.-247 с.

52. Питенов В.А., Вайновский Е.А. Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки. - М., 1997. - 20 с.

53. Плаксина Г.В. и соавт. Кристаллографический метод в детской гастроэнтерологии: Метод, рекомендации. - М., 1995. - 25 с.

54. Подорожная Р.П. Видовые особенности возрастных отличий проницаемости слюнных желез крысы, собаки и человека для разных веществ// Структура и функция гисто-гематических барьеров/ Под ред. Я.А. Росина. - М: Наука, 1971. - 27-31.

55. Постникова Т.Н., Васильев Е.Е., Андреева О.Л. Биохимические показатели слюны у больных хроническим панкреатитом// Разработка и внедрение функциональных исследований в ЦНИЛ: Мат. науч.-практ. конф. - Свердловск, 1989. - 84-85.

56. Потехина Ю.П., Зубеев П.С Кристаллографический анализ биологических жидкостей при желчнокаменной болезни// Межд. мед. журн. -2000.-№5.-С.469-473.

57. Разенков И.П. Значение исследований И.П. Павлова для клиники и дальнейшее развитие его работ в области физиологии и патологии пищеварения// Вестник АМН СССР. - 1949. - № 5. - 3-10.

58. Ригельман Р. Как избежать врачебных ошибок. - М., 1994. - 167 с.

59. Римарчук Г.В. и соавт. Кристаллографический экспресс-тест «здоров-болен» для массового обследования детей в регионах с различной экологической обстановкой// Экол. и здор. чел. - 1994. - С. 140.

60. Рысс Е.С, Звартау Э.Э. Фармакотерапия язвенной болезни. - -Пб.- М.: Невский диалект - БИНОМ, 1998. - 253 с.

61. Савельев B.C., Буянов В.М., Балалыкин А.С. Эндоскопия органов брюшной полости. - М., 1977. - 246 с.

62. Савельев B.C., Исаков Ю.Ф., Лопатин Н.А. и др. Руководство по клинической эндоскопии/ Под ред. B.C. Савельева, В.М. Буянова, Г.И. Лукомского. - М.: Медицина, 1985. - 544 с.

63. Гастроэнтерология и гепатология: Сб. науч. тр. - Томск, 2000. - 86 с.

64. Симаненков В.И., Кнорренг Г.Ю. Хронический панкреатит - известный "незнакомец"// Aqua Vitae.- 2001.- №1.- 24-8.

65. Скидан Н.И. Кристаллооптические характеристики сока предстательной железы// Кристаллографические методы исследования в медицине: Мат. науч.-практ. конф. - М., 1997. - 44-41.

66. Сонин А.С. Введение в физику жидких кристаллов. - М., 1983. - 115 с.

67. Стандарты (протоколы) диагностики и лечения больных с заболеваниями органов пищеварения. - М., 2002.- 40 с.

68. Суходоло И.В. Влияние секреторной и инкреторной деятельности слюнных желез на морфо-функциональное состояние органов пан-креато-гастро-дуоденальной системы: Автореф. дисс. канд. мед. наук. - Новосибирск, 1978. - 21 с.

69. Ткачев А.В., Яковлев А.А., Тарасова Г.Н. Оптимизация эрадика- ционной терапии язвенной болезни// Гастроэнтерология, гепатология и колопроктология. - 1999. - Т. IX. - № 5. - Приложение № 8. -С.44.

70. Трухманов А.С, Кардашева С, Ивашкин В.Т. Опыт применения париета в лечение и профилактике рецидивов гастроэзофагеальной рефлюксной болезни// Гастроэнтерология, гепатология и колопроктология. - 2002.- №4.- С 73-79.

71. Уиллис Дж. Терапевтический справочник Вашингтонского университета. -М.: Практик, 2000.- 700 с.

72. Фельдшерова Н.А. Сравнение фармакокинетических свойств и эффективности действия ингибиторов протонной помпы// Качественная клиническая практика. - 2001.- №1.- С 31-42.

73. Флюссер И., Дворецкий К., Геллер Я. Новые взгляды на значение слюнных желез// Чех. мед. обозр- 1973. - Т. 19.- № 1. - 40-51.

74. Хамитов Х.С., Хамитов Ф.С. Холинергические свойства слюны и крови при острой экспериментальной язве желудка и хронической язвенной болезни у людей// Казане, мед. журн.- 1961- № 6.- 21-24.

75. Хачидзе Д.Г., Монаселидзе Д.Р. Микрокалориметрические исследования сыворотки крови человека// Биофизика. - 2000. - Т. 45.- Вып. 2. - 320-324.

76. Циммерман Я.С., Телян И.Н. Концепция патогенеза язвенной болезни и перспективы ее излечения// Клин. мед. - 1998. - № 3. - 35-41.

77. Шабалин В.Н., Шатохина Н. Клиническая кристаллография: становление, проблемы, перспективы// Кристаллографические методы исследования в медицине: Мат. науч.-практ. конф. - М., 1997. - 3-7.

78. Шатохина Н., Плаксина Г.В., Фейзулла М.Ф. и соавт. Кристаллографические и фотометрические методы в лабораторной диагностике.-М., 1999.-98 с.

79. Шварцбейн А.А, Кононенко Е.В, Бородина М.Г., Прокашев П.В. Морфологические критерии оценки состояния детей с аллергодерма-тозами// Кристаллографические методы исследования в медицине: Мат. науч.-практ. конф. -М., 1997. - 66-68.

80. Щербаков П.Л. и соавт. Хронический гастродуоденит у детей из социально-неблагополучных условий// Восьмая сессия Российской группы по изучению Helicobacter pylori: Мат. сессии. - Уфа, 1999. -С. 11-15.

81. Щербаков П.Л. Эпидемиология инфекции Helicobacter pylori// Helicobacter pylori: революция в гастроэнтерологии. - М., 1999. - 67 с.

82. Яхно Т.А. Динамика процессов самоорганизации биожидкостей в норме и при некоторых заболеваниях// Математическое моделирование: Мат. межд. конф. - М., 2000.- 98.

83. Aim R., A. Ling L., S. Moir D.T et al. Genomic-equence comparison of two unrelated isolates of the human gastric pathogen Helicobacter pylori. Nature.-1999.- Vol.397.- P.176-180.

84. Anderson Т., Rohss K., Bredberg E., Hassan-Alin M. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of esomeprazole, the S-isomer of omeprasole. Aliment Pharmacol Ther.- 2001.- Vol. 15.- N 10.- P. 1563-1569.

85. Axon A. Helicobacter pylori ins not a commensal// Curren Opinion in Gastroenterology.- 1999.- Vol. 15.- Supl. 1,- P. 1-4.

86. Bazzoli F. Key points from the revised Maastricht Consensus Report: the impact on general practice// Eur J Gastroenterol Hepatol. - 2001. - Vol. 13 Suppl 2. - P. S3-7.

87. Berger A. Scientists discover how helicobacter survives gastric acid// BMJ.- 2000.- P. 320-268.

88. Bhasin D. K., Sharma B. C, Ray P. et al. Comparison of seven and fourteen days of lansoprazole, clarithromycin, and amoxicillin therapy for eradication of Helicobacter pylori: a report from India // Helicobacter. -2000.-Vol.5.-P.84-87.

89. Bjorkholm В., Zhukhovitsky V., Lofman C. et al. Helicobacter pylori Entry into human gastric epithelial cells: a potential determinant of virulence, persistence, and treatment failures// Helicobacter.- 2000.- №5.-P.148-54.

90. Blaser M. Hypothesis: the changing relationships of Helicobacter pylori and humans: implications for health and disease// J. Infect Dis.- 1999.-. №179(6).-P. 1523-30.

91. Brenner H., Bode G., Boeing H. Helicobacter pylori infection among offspring of patients with stomach cancer// Gastroenterology.- 2000.-№118.-P.31-5.

92. Byrd J.C., Yunker C.K., Xu Q.-S., Sternberg L.R., Bresalier R.S. Inhibition of Gastric Mucin Synthesis by Helicobacter pylori// Gastroenterology.- 2000.- №118.- P. 1072-1079.

93. Chen X.Y., Liu W.Z., Shi Y. et al. Helicobacter pylori associated gastric diseases and lymphoid tissue hyperplasia in gastric antral mucosa// J. Clin. Pathol.- 2002.- №55ю- P. 133-7.

94. Cheng Y., Macera C.A., Davis D.R., Blair S.N. Physical activity and peptic ulcers// West. J. Med.- 2000.- №173ю- P.101-107.

95. Chevalier C, Thiberge J. M, Ferrero R.L, Labigne A. Essential role of Helicobacter pylori gamma-glutamyl transpeptidase for the colonization of the gastric mucosa of mice//Mol. Microbiol.- 1999.- Vol. 31.-P.1359-1372.

96. Chowers M.Y., Keller N., Tal R. et al. Human gastrin: a Helicobacter pylori-specific growth factor// Gastroenterology.- 1999.- №117.- P.l 113-8.

97. Consensus on some issues regarding Helicobacter pylori// Chin. J. Dig. Dis.-2001.-Vol. 2.-P. 53-56.

98. D" Elios M.M., Amedei A., Manghetti M. et al. Impaired T-cell regulation of B-cell growth in Helicobacter pylori-related gastric low-grade MALT lymphoma// Gastroenterology.-1999.- №117ю- P.l 105-12.

99. Donahue J.P., Peek R.M., van Doom L.-J., et al. Analysis of iceAl transcription in Helicobacter pylori// Helicobacter.- 2000.- №5.-P. 1-12.

100. Dorrell N., Martino M. C, Stabler R. A. et al. Characterization of Helicobacter pylori PldA, a phospholipase with a role in colonization of the gastric mucosa// Gastroenterology.- 1999.- №117.- P. 1098-104.

101. El-Omar E. M., Oien K., Murray L. S. et al. Increased prevalence of precancerous changes in relatives of gastric cancer patients: critical role of H. pylori// Gastroenterology. - 2000. - Vol.118. - P.22-30.

102. Ernst P.B., Gold B.D. The Disease Spectrum of Helicobacter pylori: the immunopathogenesis of gastroduodenal ulcer and gastric cancer// Ann Rev. Microbiol.- 2000.- №54.. p.615-40.

103. Faure C, Pelatan C, Languepin J. Proton pump inhibitors in pediatrics// Arch. Pediatr.- 1999.- №6 (6).- P.650-6.

104. Figura N. Determinants of pathogenicity of Helicobacter pylori// J. Chemother. 1999.- №11 (Suppl 2).- P.22.

105. Fischbach W., Dragosics В., Kolve-Goebeler M.-E. et al. Primary gastric B-cell lymphoma: results of a prospective multicenter study// Gastroenterology.- 2000.- №119.. P.l 191-202.

106. Gomollon F., Santolaria S., Ducons J.A. et al. Does eliminating Helicobacter pylori mean the healing of the duodenal ulcer? The results of a prospective study in Spain// Gastroenterol. Hepatol. - 2000. - Vol.23. -P.62-65.

107. Gooz M., Hammond C.E., Larsen K., Mukhin Y.V., Smolka A.J. Inhibition of human gastric H+-K+-ATPase-subunit gene expression by Helicobacter pylori// AJP. - 2000.- №278 (6).- P.981-91.

108. Hansen S., Melby K.K., Aase S., Jellum E., Vollset S.E. Helicobacter pylori infection and risk of cardia cancer and non-cardia gastric cancer. A nested case-control study// Scand. J. Gastroenterol.- 1999.- №34.- P.353-60.

109. Haruma K., Mihara M., Okamoto E. et al. Eradication of Helicobacter pylori increases gastric acidity in patients with atrophic gastritis of the corpus-evaluation of 24-h pH monitoring// Aliment. Pharmacol. Ther. -1999.-Vol.l3.-P.155-162.

110. Hildebrand P., Meyer-Wyss B.M., Mossi S., Beglinger C. Risk among gastroenterologists of acquiring Helicobacter pylori infection: case-control study// BMJ.- 2000.- №321.- P. 149.

111. Hoeve M. A., Gisbertz I. A., Schouten H. C. et al. Gastric low-grade MALT lymphoma, high-grade MALT lymphoma and diffuse large В cell lymphoma show different frequencies of trisomy// Leukemia. - 1999. -Vol.13.-P.799-807.

112. Hynes S.O., Broutet N., Wadstrom T. et al. Phenotypic variation of Helicobacter pylori isolates from geographically distinct regions detected by lectin typing// J. Clin. Microbiol.- 2002.- №40.- P.227-32.

113. Icatlo F.C., Goshima H., Kimura N., Kodama Y. Acid-Dependent Adherence of Helicobacter pylori Urease to Diverse Polysaccharides// Gastroenterology.- 2000.- №119.- P.358-67.

114. Isakov V., Domareva I., Koudryavtseva L. et al. Furazolidone-based triple «rescue therapy» versus quadruple «rescue therapy» for the eradication of Rpylori resistant to metronidazole// Aliment. Pharmacol. Ther. - 2002. -P.31.

115. Ishiaki Т., Horai Y. Aliment, pharmacol. Ther.- 1999.- Vol. 13, suppl.3.- P.27-36.

116. JARC Monographs On The Evalution Of Carcinogenic Risks To Humans. Volum 61. Schistosomes, liver flukes and Helicobacter pylori. JARC. -1.ion, Frans. - 1994.

117. Kashin S., Politov Y., Agamov A. et al. Preliminary results of endoscopic mucosal resection in diagnostic and treatment of early gastric cancer and high grade epithelial dysplasia//Endoscopy. - 2000. - Vol.32. - Suppl.l. - P.E21.

118. Koskenpato J., Farkkila M., Sipponen P. Helicobacter pylori and different topographic types of gastritis: treatment response after successful eradication therapy in functional dyspepsia// Scand. J. Gastroenterol.- 2002.-.№37 (7).- P.778-84

119. Koudryavtseva L., Isakov V., Ivanikov L, Zaitseva S. Evolution of H.pylori primary resistance to antimicrobial agents in Moscow (RUSSIA) in 1996 -1998// Gut. - 2000. - Vol.47. - Suppl.l. - P.A8.

120. Kuipers E.J. Helicobacter pylori, MALT lymphoma and gastric cancer//. J. Chemother.-1999.- №11 (Suppl -2).- P.25.

121. Laine L. Esomeprazole in the treatment of Helicobacter pylori// Aliment. Pharmacol. Ther. -2002.- №16 (Supp 1- 4).-P.l 15-8.

122. Lamberts R., Brunner G., Solcia E. Effects of very long (up to 10 years) proton pump blockade on human gastric mucosa// Digestion.- 2001.- №64 (4).- P.205-13.

123. Lee J.M., Bresling N.P., Hynde D.K. et al. Threatment options for Helicobacter pylori infection proton pump inhibition - based triple therapy fails in clinical practice// Aliment. Pharmacol. Ther. - 1999. -Vol. 13.-P.489-496.

124. Liu W.-Z., Xiao S.-D., Shi Y. et al. Furasolidon - containing short - term triple therapies are effective in the treatment of Helicobacter pylori infection// Aliment. Pharmacol. Ther. - 1999. - Vol. 13. -P.317-322.

125. Ljubicic N., Banic M., Kujundzic M. et al. The effect of eradicating Helicobacter pylori infection on the course of adenomatous and hyperplastic gastric polyps// Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. - 1999. - Vol.11. -P.727-730.

126. Malfertheiner P., Megraud F, O"Morain C , et al. Current concepts in the management of H.pylori infection-the Maastricht 2-2000 Consensus Report// Aliment. Pharmacol. Ther.- 2002. - Vol. 16 (2). - P. 167-80.

127. Mattapallil J.J., Dandekar S., Canfield D.R., Solnick J.V. A predominant Thl type of immune response is induced early during acute Helicobacter pylori infection in rhesus macaques// Gastroenterology.- 2000.- №118.-P.307-15.

128. McColl K.E., Kennerley P. Proton pump inhibitors-differences emerge in hepatic metabolism// Dig. Liver Dis.- 2002.- №34 (7).- P.461-7.

129. Marshall B.J., Warren J.R. Unidentified curved bacilli in the stomach of patients with gastritis and peptic ulceration// Lancet. - 1984. - Vol. 1. -P.1311-1315.

130. Michetti M., Kelly C. P., Kraehenbuhl J.-P., Bouzourene H., Michetti P. Gastric mucosal 47-integrin-positive CD4 T lymphocytes and immune protection against Helicobacter infection in mice// Gastroenterology.-2000.-№119.-P.109-18.

131. Michetti P., Kreiss C, Kotloff K. L. et al. Oral immunization with urease and Escherichia coli heat-labile enterotoxin is safe and immunogenic in Helicobacter pylori-infected adults// Gastroenterology. - 1999. - Vol.116. -P.804-812.

132. Michetti R., Dorta G., Wiesel P.H. et al. Effect of Whey-based culture supernatant of Lactobacillus acidophilus (johnsonii) La 1 on Helicobacter pylori infection in humans// Digestion. - 1999. - Vol. 60 (3). - P.203-209.

133. Mizushima Т., Sugiyama Т., Kobayashi T. et al. Decreased adherence of cagG-deleted Helicobacter pylori to gastric epithelial cells in Japanese clinical isolates// Helicobacter.- 2002.- №7.- P.22-9.

134. Moayyedi P., Soo S., Deeks J. et al. Systematic review and economic evaluation of Helicobacter pylori eradication treatment for non-ulcer dyspepsia// BMJ. - 2000. - Vol.321. - P.659-664.

135. Peek R.M. Microbes and microbial toxins: paradigms for microbial- mucosal interactions. Helicobacter pylori strain-specific activation of sig-nal transduction cascades related to gastric inflammation// AJP - GL-2001.- №280 (4).- P.G525-30.

136. Periti P., Tonelli F., Capurso L., Nicoletti P. Managing Helicobacter pylori infection in the new millennium: a review// J. Chemotherapy.- 1999.-№ll(Suppl-4).-P.3-55.

137. Perri F., Festa V., Clemente R. et al. Rifabutin-based "rescue therapy" for Helicobacter pylori infected patients after failure of standard regimens// Aliment. Pharmacol. Ther. - 2000. - Vol.14. - P.311-316.

138. Pfeiffer Fecondite de la terre. - Paris: Triades, 1953. - T. 1, №2.

139. Rappuoli R. Vaccination against stomach ulcers caused by Helicobacter pylori. Proceedings of the 9th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases, Berlin, 1999. Clin. Microbiol. Infect.- 1999.-№5 (Suppl 3).- P.44.

140. Rautemaa R., Rautelin H., Puolakkainen P. et al. Survival of Helicobacter pylori from complement lysis by binding of GPI-anchored protectin (CD59)// Gastroenterology.- 2001.- №120.- P.470-9.

141. Rieder G., Einsiedl W., Hatz R.A. et al. Comparison of CXC chemokines ENA-78 and interleukin-8 expression in Helicobacter pylori-associated gastritis// Infection and Immunity.- 2001.- №69.- P.81-8.

142. Riggio M.R., Lennon A. Identification by PCR of Helicobacter pylori in subgingival plaque of adult periodontitis patients// J. Med. Microbiol. -1999. -Vol. 48, № 3. - P.317-322.

143. Salas M., Ward A., Are proton pump inhibitors the first choice for acute treatment of gastriculcers? A meta analysis of randomized clinical trials// Caro J. BMC Gastroenterol.- 2002.- №15.- P.2-17.

144. Sjolund K., Ljungh A. Report from an international consensus conference in Maastricht. Management and treatment of H.pylori infection// Lakar-tidningen. - 2001. - Vol. 98 (11). - P. 1235-8.

145. Sole A. Stagoskopie. - Wien, Franz Deuticke, 1960. - 92 p.

146. Solnick J.V., Schauer D.B. Emergence of diverse Helicobacter species in the pathogenesis of gastric and enterohepatic diseases// Clin. Microbiol. Rev.- 2001.- №14.- P.59-97.

147. Suerbaum S., Chin Hur, Ch. Josenhans, P. Michetti. Pathogenesis and virulence factors of Helicobacter pylori. Current Opinion in// Gastroenterology.-1999.-Vol. 15.- Suppl. 1.-P.S11-S16.

148. Sung J.J.Y., Lin S.-R., Ching J.Y.L., Zhou L.-Y., To K.F., Wang R.-T., et al. Atrophy and intestinal metaplasia one year after cure of H.pylori infection: a Prospective, randomized study// Gastroenterology.- 2000,- №119.-P.7-14.

149. Treatment of H.pylori infection: The guidelines of Chinese society of gastroenterology// Chin. J. Gastroenterol. - 2000. - Vol. 5. - P. 77.

150. Van den Brink G.R., ten Kate F.J., Ponsioen C.Y., Rive M.M., Tytgat G.N., van Deventer S.J., Peppelenbosch M.P. Expression and Activation of NF-B in the Antrum of the Human Stomach// J. Immunology.- 2000.-№164.-P.3353-9.

151. Van Doom L.-J., Figueiredo C, Megraud F., et al. Geographic distribution of vacA allelic types of Helicobacter pylori// Gastroenterology,-1999.-№116.-P.823-30.

152. Vandenplas Y. Helicobacter pylori infection// Clin. Microbiol. Infect- 1999.-№5.-P.l-ll.

153. Vanderhoff В.Т., Tahboub R.M. Proton pump inhibitors: an update// Am. Fam. Physician.- 2002.- №15.- P.273-80.

154. Webb P.M., Crabtree J.E., Forman D., and the Eurogast Study Group. Gastric cancer, cytotoxin-associated gene A-positive Helicobacter pylori, and serum pepsinogens an international study// Gastroenterology.- 1999.-№116.-P.269-76.

155. Xiao S. D., Liu W. Z., Hu P. J., et al. A multicentre study on eradication of Helicobacter pylori using four 1-week triple therapies in China// Aliment. Pharmacol. Ther.- 2001.- Vol. 15 (1). - P.81-6.

156. Yamaoka Y., El-Zimaity H.M.T., Gutierrez O. et al. Relationship Between the cagA 3" Repeat Region of Helicobacter pylori, Gastric Histology, and Susceptibility to Low pH// Gastroenterology,- 1999.- №117.-P.342-9.

157. Zavros Y., Reider G., Ferguson A. et al. Hypergastrinemia in response to gastric inflammation suppresses somatostatin// Am. J. Physiol. Gastro-intest. Liver Physiol.- 2002.- №282.- P. 175-83.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.

Взаимосвязь показателей функционального состояния яичников на протяжении менструального цикла

Фотографии кристаллизации слюны в тест-микроскопе АРБОР-Элит

Процесс повышения количества эстрогенов сопровождается ростом выраженности кристаллизации слюны («эффект арборизации»), которая начинает проявляться у здоровой женщины за 6-7 дней до дня овуляции, достигая максимума в день овуляции (этот день соответствует максимальной выраженности кристаллизации - появлению «листьев папоротника») . Таким образом, наблюдая в тест-микроскоп за выраженностью кристаллизации слюны, мы можем судить о соотношении гормонов (эстрогенов и прогестерона) и выявить, на какой день цикла приходится выход яйцеклетки.

После того, как Вы убедились, что Ваше гормональное состояние в норме, Вы можете получить достоверную информацию о наступлении «опасных» или «безопасных» дней в интересующем Вас цикле.

Приобрести тест-микроскоп "АРБОР-Элит" Вы можете в нашем интернет-магазине

Введение

Глава 1. Обзор литературы слюна как биоматериал для диагностики 7

1.1. Роль слюнных желез в гомеостазе организма и тканей полости рта... 7

1.2. Состав и свойства слюны и ротовой жидкости при некоторых патологических состояниях 9

1.3. Кристаллографические исследования биожидкостей 14

1.4.Общие сведения о кристаллографии и свойствах кристаллов 17

1.5. Жидкокристаллическая структура слюны 21

1.6. Компоненты слюны, влияющие на ее структурную и кристаллобразующую функцию 22

17. Сахарный диабет. Этиология, патогенез, клиника 28

1.7.1. Изменения слюнных желез при сахарном диабете 31

1.7.2. Экспериментальные исследования 36

Глава 2. Материал и методы исследования 41

2.1. Объекты исследования 41

2.2. Материалы исследования 51

2.3. Получение препаратов кристаллограмм слюны 52

2.4. Методы исследований 52

2.5.Текстурный анализ 54

2.6. Многомерный статистический анализ 57

Глава 3. Собственные исследования 61

3.1. Кристаллизация ротовой жидкости в норме 61

3.2. Кристаллизация ротовой жидкости у больных с сахарным диабетом 79

3.3. Сахарный диабет П типа 91

Список литературы 113

Введение к работе

Исследования последних лет показали большую распространенность диабета во всех странах мира (от 1,5 до 3% всего населения). По данным различных источников, количество больных диабетом в мире превысило 177 млн. человек, а по данным экспертов ВОЗ, к 2025 оно составит 300 млн. человек. Рост заболеваемости сахарным диабетом, большая частота осложнений и повышение трудозатрат на их лечение, увеличение инвалидизации трудоспособного населения страны определяют актуальность данной проблемы, ее медико-социальную и экономическую значимость. (Балаболкин М.И., 1998; Беляков Ю.А., 1983; Дедов И.И., 1995; Мазовецкий АХ., Беликов BJC, 1987; «О мероприятиях по реализации федеральной целевой программы «Сахарный диабет», Приказ МЗ РФ №340 от 25.11.98; Питер Дж.Уоткинс, 2000).

В настоящее время для установления правильного диагноза при различных видах патологии (воспалительных, опухолевых, сосудистых заболеваниях, травм мозга, болевых синдромах и др.) в качестве дополнения к другим диагностическим методам используется кристаллографический метод исследования. Суть его состоит в анализе фигур кристаллизации, образующихся при высушивании различных биологических жидкостей (слюна, слеза, моча и др.) (Deams,1964; Неретин В.Я., Кирьяков В.А., 1977; Мороз Л.А. и др.,1981). Также этот метод нашел применение в фармакологии (Фигуровский Н.А., Борисова В.Г., 1957), в гигиенических исследованиях (Кожинова Л А, Масленникова Л.С.Д968), в судебной медицине (Степанов А.В., 1951; Швайкова М.Д., 1959). Способ уже применяется в стоматологии. С его помощью изучался патогенез ряда стоматологических заболеваний: кариеса, (Леус П. А, 1977,1983; Токуева Л.И, Кузьмина Л.Н., 1990), красного плоского лишая (Ярвиц А. А., 1994).

За последние годы была разработана унифицированная методика изучения и оценки фигур кристаллизации слюны (Барер Г,М., Денисов АЛх,

5 2000; Стурова Т.М., 2003).

Вместе с тем, анализ выполненных работ свидетельствует о несопоставимости результатов на основании использовавшихся методов получения кристаллических структур, не разработаны критерии описания результатов. Поэтому данные противоречивы и нужны новые методические исследования.

Нами не обнаружено сведений относительно изучения кристаллизации слюны при сахарном диабете.

Цель исследования.

Определить критерий диагностики и дифференциальной диагностики сахарного диабета I и II типа по оценке фигур кристаллизации слюны.

Задачи исследования.

Разработать критерий описания морфологии кристаллизации.

Оценить влияние сахарного диабета на стоматологический статус, в том числе и на морфологию кристаллов слюны.

Определить основные морфологические виды кристаллов слюны при различных типах сахарного диабета с целью дифференциации по типу кристаллов между собой.

Научная новизна исследования.

Впервые будет проведен сравнительный анализ морфологии кристаллизации слюны у здоровых лиц и больных сахарным диабетом I и I типа. Будут разработаны дифференциально - диагностические критерии кристаллизации слюны между I и I типами сахарного диабета.

При многомерном статистическом анализе установлено, что кристаллические агрегаты слюны разделяются на норму и патологию при сахарном диабете I и II типа. Кристаллические агрегаты образуют самостоятельные группы, что может служить диагностическим критерием.

6 Практическая значимость.

Применение унифицированной методики кристаллизации слюны позволит избежать использования дорогостоящей аппаратуры в диагностике и дифференциальной диагностике эндокринных заболеваний. Но для широкой клинической практики метод пока не пригоден, так как требует большого количества экспертных морфометрических измерений, необходимых приспособлений для получения изображения кристаллограмм, а также компьютеров со специальной программой многомерного статистического анализа. В дальнейшем метод является перспективным для исследования кристаллографии при других видах патологии, а также разработки специальной компьютерной программы для автоматизированного анализа кристаллограмм.

Внедрение результатов.

Результаты исследований внедрены в учебный процесс на дневном и вечернем отделениях стоматологического факультета, на курсах повышения квалификации врачей - стоматологов и преподавателей ФПДО МГМСУ.

Основные положения, выносимые на защиту диссертации.

Дендровидные и другие микрокристаллы смешанной слюны могут быть экспертно описаны, как количественно, так и качественно.

Использование многомерной статистики позволяет четко разделить кристаллографическую картину нормы и патологии.

Кристаллографическая картина « нормы » не зависит от пола и возраста.

При сахарном диабете I и П типа образуется нозологически - специфичный набор вариантов микрокристаллов, что может использоваться для диагностических целей.

Состав и свойства слюны и ротовой жидкости при некоторых патологических состояниях

По своей химической природе слюна это раствор: однородная смесь нескольких веществ, а компонент находящийся в избытке называется растворителем (Советский энциклопедический словарь, 1990, С. 1115). «Растворителем» в слюне является вода. Вся слюна состоит из 94 % воды и 6 % сухого вещества, 1/3 которого составляют неорганические и 2/3 органические вещества. По концентрации растворенного вещества растворы подразделяются на насыщенные, ненасыщенные и перенасыщенные. По этой классификации, слюна является раствором перенасыщенным ионами Са2+ и НРОг,что является основным механизмом поддержания постоянства состава эмали зубов (В.К. Леонтьев, 1978). Для различных целей оценивают как физические, так и химические показатели слюны. Величины этих показателей в свою очередь служат для: 1. оценки нормы или патологии собственно СЖ (А.В. Шипский, В.В. Афанасьев; 1997). 2. диагностики различных соматических заболеваний (см. таблицу 2); 3. в экспериментальной фармакологии (К.М. Лакин и др., 1987). 4. оценки «здоровья» человека (P.M. Баевский, 1979, Morse и соавт.1984); 5. экологического мониторинга (И.М. Макеева, 1992; Е.В. Евстафьева, 1996; Ю.Л. Образцов, 1997); Химические и биохимические показатели слюны. В зависимости от целей и задач исследований в слюне могут определены практически все химические элементы. Состав слюны (неорганические и органические компоненты) достаточно полно охарактеризован (А.Б.Денисов. 2003: 1996, Buddecke Е. , 1981; Saliva and dental health., 1990). В качестве «критериев» могут быть использованы как качественные (появление/исчезновение признака), таге и количественные показатели. По своей химической природе слюна это раствор: однородная смесь нескольких веществ, а компонент находящийся в избытке называется растворителем (Советский энциклопедический словарь, 1990, С. 1115). «Растворителем» в слюне является вода.

Вся слюна состоит из 94 % воды и 6 % сухого вещества, 1/3 которого составляют неорганические и 2/3 органические вещества. По концентрации растворенного вещества растворы подразделяются на насыщенные, ненасыщенные и перенасыщенные. По этой классификации, слюна является раствором перенасыщенным ионами Саг+ и НРОг,что является основным механизмом поддержания постоянства состава эмали зубов (В.К. Леонтьев, 1978). Для различных целей оценивают как физические, так и химические показатели слюны (табл.1). Величины этих показателей в свою очередь служат для: 1. оценки нормы или патологии собственно СЖ (А.В. Шипский, В.В.Афанасьев; 1997). 2. диагностики различных соматических заболеваний (см. таблицу 2); 3. в экспериментальной фармакологии (К.М. Лакин и др., 1987). 4. оценки «здоровья» человека (P.M. Баевский, 1979, Morse и соавт.1984); 5. экологического мониторинга (И.М. Макеева, 1992; Е.В. Евстафьева, 1996; Ю.Л. Образцов, 1997); Много десятилетий, стоматологи используют слюну для оценки риска кариеса, измеряя его буферную способность и содержание бактерий. В последнее время слюна все более и более используется для постановки диагноза системных болезней, которые влияют на функцию слюнных желез и состав слюны, таких как синдром Сегрена, алкогольный цирроз, муковисцидоз, саркоидоз, сахарный диабет и болезни коры надпочечников. Введение метода реакции полимеразных цепей привело к использованию жидкостей полости рта как источник микробной ДНК для обнаружения вирусов (например, вируса герпеса связанный с саркомой Калоши) и бактериями (например, Helicobacter pylori, который вызывает гастрит, язвенную болезнь и возможно рак желудка) (Koelle et al,1997; Refflyetal.,1997). Кроме того, можно установить диагноз инфекционных болезней, по количеству антител к микроорганизмам, найденным в слюне и полости рта. Например, в прошлые 10 лет исследователи показали, что обнаружение в слюне к HTV (Malamud, 1997) представляет собой атравматичную альтернативу к определению количества антител в крови для контроля эффективности антивирусной терапии и прогрессии СПИДа (Shugars et al., 2000). До недавнего времени, передача ВИЧ через слюну инфицированных индивидуумов в течение лечения зубов или как следствие резкого кашля вызывала беспокойство (Baron 2001, Baron et al., 1999). В исследованиях последних лет были найдены Hiv - антитела, антимикробные слюнные факторы защиты и секреторный ингибитор протеазы лейкоцитов, что позволяет полости рта ингибировать ВИЧ инфекцию (Shugars, Wahl , 1998; Shugars 1999). Полученные данные объясняют тот факт, что через слюну не наступает заражение ВИЧ. Кроме того слюна в полости рта гипотонична, что приводит к гибели ВИЧ инфицированных клеток з полости рта (Baron 2001, Baron et al., 1999). Таким образом, уровни белка и соли в слюне служат как важные биомаркеры иммунорезистентности организма.

Кристаллографические исследования биожидкостей

Первое определение химических веществ по их кристаллографическим признакам было выполнено в 1804 г. Т.Е. Ловицом в России. Он обнаружил после испарения на стекле солевых растворов характерный для каждой соли рисунок кристаллов. Затем это явление было забыто и вновь к использованию этого феномена вернулись в середина прошлого столетия. В разных странах, с разными целями, кристаллическими рисунками, образующимися при высушивании химических растворов и биожидкостей заинтересовались биологи и медики. Метод кристаллических налетов нашел применение в фармакологии для качественного анализа лекарств (Фигуровский Н.А. , Борисова В.Г., 1957, Рубинская В. Г, 1961; Рубинская В.Г., Фигуровский Н.А., 1962;Зимнухов В. В. 1964, Никольская М.Н.. Гандель В.Г. , Полков В.А.. 1965; Позднякова В.Т., Головкин В. А.,1965;

Позднякова В.Т., Роговский Д.Ю., Головкин В.АД965; Саломатин Е.М.,1965), в гигиенических исследованиях для идентификации пестиіщдов во внешней среде (Кожшюва Л. А., Масленникова Л.С.,1968). Микрокристаллические реакции используют судебные химики (Степанов А.В., 1951; Швайкова М.Д., 1959, Белова А. В., 1964. Лобанов В.И., 1966; Ильясов ЯЗ., 1966). В медицинской практике кристаллографическое исследование крови впервые было проведено голландскими учеными Daems и Theslgrafle (1964) у больных с гипертрофией и карциномой простаты. В нашей стране указанный метод был впервые использован в 1977 году В.Я. Неретиным и В.А.Кирьяковым при исследовании спинномозговой жидкости у больных с заболеваниями ЦНС. Обзор литературы предполагает, анализ (всесторонний разбор) и сравнение (процедура оценки сходство - различие между объектами) полученных ранее результатов. Но нами обнаружено, что. эти исследования почти не возможно провести по следующим причинам. Во-первых с помощью микрокристаллизации были исследованы различные биологические жидкости (табл.3), свойства которых существенно отличаются друг от друга (например слюна и стекловидное тело). Во вторых равноценно используются три способа, кристаллизации биожидкостей. 1. - кристаллизация при испарении воды из биожидкости слюны: она высушивается на предметном стекле. 2. тсзиграфия - кристаллографический метод исследования основанный на изучении форм кристаллов, полученных при действии кристаллообразующего вещества (обычно это CuCl 2) на биосубстрат. 3. - кристаллизация в «сендвич-ячейке» (образуемой предметным и покровным стеклом), экстракта липидной фракции биожидкости в спиртовом раствора лецитина (лиотропный ЖК). Обобщая данные для таблицы № 2, мы обратили внимание, на то, что, как правило, проведенные исследования не имеют продолжения в практической медицине.

Получение препаратов кристаллограмм слюны

Оценка была выполнена экспертным методом, и кристаллография проходила вручную, без использования математических технологий. Получение изображения кристаллограмм Исследование структуры образцов слюны выполняли с помощью оптического микроскопа Leica DM -LS (Германия) с аналоговой видеокамерой Sony SSC-DC30P , 72 (ppi). Захват изображение проводился с помощью видиоплаты (видиобластера) ASUS 3 DP- V264 GT/ PRO и передавался на экран монитора. Вначале при малом увеличении проводилось сканирование всей поверхности высушенной капли, а затем при большом увеличении исследовались отдельные участки поверхности с различной морфологией. Выбранные участки кристаллограммы записывались в виде графического файла на компьютере со следующими параметрами 362 X 280 пике с 256 градациями яркости («серой» шкалы). Файлы сохранялись как растровое изображение с разрешением 300 dpi в формате BMP. При высушивании слюны (переход ее в твердую фазу) на открытой поверхности возникают характерные (папоротникововидные) кристалжиеские структуры. Образование микрокристаллов неравномерно в различных зонах высушенной капли (Шатохина С.Н., 1995). И, главное, вид кристаллов заметно отличается в них (Михалева И.Н., 2000). Объяснение этого явления связано с влиянием скорости и направления отвода тепла, конвекционные токи жидкости и т.д. (Вегман Е.Ф. и соавт., 1990). Микрофото кристаллограмм сохранялись в виде графических файлов. Для обработки графических изображений использовали программы Adode Photoshop 6,0 HPhotoDraw2000. Полученные биометрические результаты заносились в электронную таблицу Excel 2000 из пакета Microsoft Office 2000 SR-1. Данные анализировали на компьютере с использованием статистических пакетов: STATISTICA -5.0 (StatSoft Inc.USA); модули - основные статистики (Basic statistics/Tables), и кластерный анализ (Cluster analysis). STATGRAPHICS Plus 5.0 (Manugistic Inc.USA) - программы многомерного анализа данных - кластерный анализ (Cluster Analysis), дискриминативный анализ (Discriminant Analysis). Для оценки нулевой гипотезы был использован критерий t - Стью-дента. Результаты считали достоверными при Р 0,05. В процессе исследования было установлено, что в ряде случаев образования микрокристаллов не происходит, хотя изображение не является гомогенным, а текстурировано (рис. 4а. 46).

А именно при СД І в 30% случаев, а при СД І в 18%. В литературе существуют несколько определений текстур. Мы приводим одно из них принятое в кристаллографии. Агрегат называет тексту pup о ванным, если ориентировка его кристаллитов относительно внешних, координатных осей не является случайной. Максимальный угол разориентировки кристаллитов относительно внешних осей и плоскостей, задающих текстуру, называют углом рассеяния текстуры. Типы текстур: - кольцевая текстура: одна из плоскостей совокупности { hi} каждого кристаллита расположена параллельно внешней оси (нормали к { hi } перпендикулярны оси), обозначение (h,); - аксиальная текстура: эквивалентные направления [Щ всех кристаллитов параллельны внешней оси; обозначения ; - ограниченная текстура: плоскость (hj) кристаллитов на внешней плоскости, направление {TJi ] этой плоскости параллельно внешнему направлению; обозначение (hi). Рис. 46. Вид текстуры высохшей смешанной слюны при сахарном диабете. Для текстурного анализа была использована программа Hesperus v. 3.0 beta. Методы текстурного анализа включенные в Hesperus используют как гистограмму, так и матрицу пространственной зависимости (GLCM). Текстура может выделяться на основании различных критериев. Применение любого из этих критериев к изображению дает на выходе другое изображение, где интенсивность каждого пиксела отражает величину соответствия этому частному критерию в конкретной точке входного изображения. Результаты текстурного анализа обычно трактуются как одно многоканальное изображение, и могут быть поданы на вход к стандартному Байесовому классификатору, который группирует текстуры по классам. Матрица пространственной зависимости (GLCM - gray level cooccurrence matrix) - гистограмма второго порядка, показывающая вероятность совместного появления двух определетіт.тх значений пикселов на заданном расстоянии и в определенном направлении. Размеры матрицы зависят от количества градаций цвета берущихся в рассмотрение. В Hesperus применяются матрицы размером 256x256 элементов, что соответствует 256 оттенкам серого цвета. На основе матрицы пространственной зависимости вычисляется большое число текстурных характеристик.

Кристаллизация ротовой жидкости у больных с сахарным диабетом

Конечной целью нашего исследования состояла в том, чтобы выявить (разработать) критерии диагностики и дифференциальной диагностики эндокринного заболевания - сахарного диабета по оценке фигур кристаллизации слюны. В этой серии исследований нами было обследовано 96 больных. Из них 55 человек с СД П-го типа и 41 пациента с СД 1-го типа, Общие сведения приведены в таблице № 20. После анализа морфологии кристаллов у больных СД I смешанная слюна нами обнаружено следующее. В 30% случаев не происходит образование микрокристаллов, хотя изображение не является гомогенным, а текстурировано. Во всех других случаях в слюне образуются микрокристаллы, часть которых качественно отличаются от нормы.

Образуются тела кристаллов с измененные отростками и вершинами. Наиболее часто (74% случаев) образуются « объемные кристаллы» (рис.21).

Такой рост кристаллов возможен при оптимальных условиях крислаллизации. Особенностью морфологии кристаллов при СД I характерно образование отростков первого порядка с одной стороны - CUM - 61% (рис.22). В таком же проценте появляется кристаллы с расщеплением вершин - CST - (рис.23). При СД - I нарушается процесс образования отростков: в половине случаев (48%) кристаллы имеют длинные ветвящиеся на концах отростки - LSD (рис. 24). В другой половине случаев наоборот, образуются короткие деформированные отростки - CBD (рис. 25). В 39% случаев рост микрокристаллов напоминает « коралловую ветвь» - ССВ (рис. 26).

У лиц больных сахарным диабетом П-го типа в 26% появляются кристаллы с одним ветвящимся отростком (признак СВМ) (рис.28). Наиболее редки «голые кристаллы», без роста отростков- FAB (22%) (рис.29).

Таким образом при инсулин зависимом сахарном диабете рост микрокристаллов в смешанной слюне качественно изменяется.

Для дальнейшего анализа полученных данных нами был использован многомерный статистический анализ данных. Полученные данные в контроле - (20 человек, 16 показателей) и в опыте (30 больных, 31 показатель). А также пять дополнительные показателей: 1) пол; 2)возраст; 3)длительность заболевания; 4) наличие пародонтита и 5) состояние высоты прикуса, были занесены в электронную таблицу STATGRAPHICS и подвергнуты кластерному анализу. В качестве метода исследования был выбран методы Joining (tree clustering) - метод построения дендрограммы или дерева объединения. В качестве параметров кластерного анализа был выбран метод Wards, выделяющий кластеры с приблизительно равным числом членов. В качестве ключевой метки (Point Labels) была выбрана группа исследования. На рисунке 31 представлены результаты разбиения массива данных на 2 кнастера. Видно, что результате кластеризации произошло полное разделение на кластеры больных (цифра 3) и здоровых лиц (цифра 1). Эти результаты совпадают в данными литературы о том, что при сахарном диабете синтетические процессы в слюнных железах мало изменены.

Таким образом, нами впервые систематизированы и описаны морфологические признаки, характеризующие кристаллические агрегаты смешанной слюны у больных страдающих сахарным диабетом 1-го типа.

Обозначения. По оси абсцисс - наблюдения, скомбинированные в соответствии с проведенным анализом, где 1 - норма, 3 -сахарный диабет. По оси - ординат - расстояние (distance) для каждого шага работы агломеративного иерархического алгоритма кластеризации.

Смешанная слюна больных сахарным диабетом П типа кристаллизуется со своими отличиями. При этом типе CD также как и при CD І в ряде случаев (18%) не происходит образование микрокристаллов, а изображение текстурировано. Это в два раза реже чем при CD I.

Во всех других случаях в слюне образуются микрокристаллы, часть которых качественно отличаются от нормы. Образуются тела кристаллов с измененные отростками и вершинами (рис.31). Сокращенное обозначение видов кристаллов приведено было раньше в таблице № 17 .